大鼠小肠粘膜上皮细胞细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Saos-2，人成骨肉瘤细胞

Caco-2，人结直肠腺癌细胞

NCI-N87 [N87]人胃癌细胞

MGC80-3（MGC-803）人胃癌细胞

EC109，人食管癌细胞

HGC-27人胃癌细胞

AGS人胃腺癌细胞

U251人胶质瘤细胞

THP-1人单核白血病细胞

HuH-7人肝癌细胞

RBE, 人肝胆管癌细胞

MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞

KM3, 人多发性骨髓瘤细胞

QGY-7701, 人肝癌细胞

PANC-1, 人胰腺癌细胞

U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞

Hep G2, 人肝癌细胞系

PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)

GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞

QBC-939, 人胆管癌细胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞

SGC-7901, 人胃腺癌细胞系

SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞

SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞

A549, 人肺癌细胞系

A-375 [A375], 人恶性黑素瘤细胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株