操作人员使用Elisa试剂盒前的操作须知介绍
点击次数:420 更新时间:2022-06-27
Elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),往预先包被GSH捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成较终的黄色,颜色的深浅和样品中的GSH呈正相关,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
Elisa试剂盒的操作须知:
1.分析前质控
① 特色 :在固相外表组装免疫活性物质形成“免疫吸附剂”;
② 酶标记免疫活性物质,进行信号扩大;
③ 有二步温育反应二次洗涤过程;
④ 灵敏度特异性相对较高;
⑤ 局限性:只能检测到ng;
⑥ 精密度差(批内CV15-20%);
⑦ 线性规模窄(一个数量级);
⑧ 存在"HD-HOOK"效应。
2.试验检测人员需经过培训,把握这几方面的技术知识:
① 检验项目的基本原理;
② 临床意义;
③ 熟悉检测技巧,了解易出差错的环节及难点;
④ 熟悉检测试剂功能(包括试剂盒组成,包被片段及其组成);
⑤ 熟悉检测仪器的原理及功能;
⑥ 把握数据处理的能力和质量操控知识;
⑦ 某些特别项目的检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班,考试合格后持证上岗。