①过夜冷消化 将取得的组织用 Hanks 液洗三次，剪成碎块大小为 4 毫米左右，用 Hanks 液洗 2~3 次以除去血球和脂肪组织，再加入 0.25% 的，摇匀后放 4℃过夜，次日再用 Hanks 液洗涤，弃去上清，共洗 2~3 次，然后，加入少量营养液吹打分散，细胞计数，按适当的浓度分瓶培养。

   ②多次提取消化法 多次提取消化法有以下三种：

   热消化多次提取 -- 将剪碎的细胞块加入 0.25% 37℃水浴中消化 5~20 分钟，然后经洗涤后用营养液分散制成细胞悬液，按合适的浓度分瓶培养，然后将留下的未*消化的组织按上述方法操作，再消化提取细胞。

   冷消化多次提取 -- 方法同上，只是消化温度为 4℃。

   先热消化后冷消化 -- 将组织块先用于 37℃下消化 20 分钟经洗涤后用营养液分散，制成悬液，剩余未消化的小组织块经洗涤后用于 4℃下过夜，次日再提取细胞，分散成悬液，分瓶培养。