elisa检测原理及其方法：
方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
　　.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为～0μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。
　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.ml。37℃孵育0.5～小时，洗涤。
　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml，37℃0～30分钟。
　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则40nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.倍，即为阳性。
　　方法二　用于检测未知抗体的间接法：　　　
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至～0μg／ml，每孔加0.ml，4℃过夜。
2、次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW（超纯水）洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
3.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml，37℃0～30分钟。
4.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
5.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则40nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.倍，即为阳性。