ELISA常用方法对比

我们知道，ELISA可分为多种类型测定，是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。 我公司技术部将各种ELISA常用方法的优势劣势进行对比，结果如下：

一、间接法：此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。

优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它zui多的免疫反应性。

劣势：交互反应发生的机率较高。

二、双抗体夹心法：被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量；或不标记，再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。

优势：高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。

劣势：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

三、直接法：将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。

优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。

劣势：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。