小液流法测定植物组织水势技术分析

一、 原理

TSZ Elisa试剂盒将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的，可以根据公式算出其渗透压，取其负值，为溶液的渗透势(ψπ)，即代表植物的水势(ψw)(waterpotential)。

ψw=ψπ=-P=-CRT(大气压)

二、材料、仪器设备及试剂

(一)材料：小白菜、菠菜、油菜或其它作物叶片

(二)仪器设备：.带塞小瓶2个;2.带有橡皮管的注射针头;3.镊子;4.打孔器5.培养皿。

(三)试剂：.0.05、0.0、0.5、0.20、0.25、0.30mol/L蔗糖溶液;2.甲烯蓝粉末。

三、实验步骤

(一)取干燥洁净的瓶6个为甲组，各瓶中分别加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液约4ml(约为瓶的2/3处)，另取6个干燥洁净的瓶为乙组，各瓶中分别加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液ml和微量甲烯蓝粉末着色，上述各瓶加标签注明浓度。

(二)取待测样品的功能叶数片，TSZ Elisa试剂盒用打孔器打取小圆片约50片，放至培养皿中，混合均匀。用镊子分别夹入5～8个小圆片到盛有不同浓度的甲烯蓝蔗糖溶液的瓶中(乙组)。盖上瓶塞，并使叶圆片全部浸没于溶液中。放置约30～60min，为加速水分平衡，应经常摇动小瓶。

(三)经一定时间后，用注射针头吸取乙组各瓶蓝色糖液少许，将针头插入对应浓度甲组瓶溶液中部，小心地放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向。(每次测定均要用待测浓度的甲烯蓝蔗糖溶液清洗几次注射针头)。如此方法检查各瓶中液流的升降动向。若液流上升，说明浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小(即植物组织失水);表明叶片组织的水势高于该浓度糖溶液的渗透势;如果蓝色液流下降则说明叶片组织的水势低于该糖溶液的渗透势，若蓝色液流静止不动，则说明叶片组织的水势等于该糖溶液的渗透势，此糖溶液的浓度即为叶片组织的等渗浓度

四、结果计算

将求得的等渗浓度值代入如下公式：

ψw=ψπ=-CRTi×.03×0.。式中：ψw=植物组织的水势(单位：Mpa)ψπ=溶液的渗透势C=等渗浓度(mol/L)R=气体常数(0.00834MPa/L/mol/K)T=温度i=解离系数(蔗糖=，CaCl2=2.60)大气压=.03=0.MPa。

【注意事项】

.TSZ Elisa试剂盒所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。

2.2取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速，以免失水。

3.3带有结晶水的甲烯蓝不易溶于CaCl2溶液，可在00℃下烘干成无水甲烯蓝粉末使用。