TSZ Elisa试剂盒在免疫酶技术中,首先要确定的变异因素就是酶标记物的工作浓度。因为酶标记物浓度的很小变化,便可导致试验结果产生很大的波动。另外,由于浓度过高,可使非特异性反应增加,而浓度过低又可影响测定的敏感性。因此,正式试验前必须准确滴定其工作浓度。
酶标记抗体的滴定方法是:将抗原(或抗体)物理吸附于固相载体上,然后将经过一系列稀释的酶标抗体(或抗Ig抗体)与吸附在载体上的抗原(或抗体)起反应,以酶与底物的显色反应程度来确定酶标记抗体的效价,或称工作浓度。
其步骤为:先将抗原(或抗体)用0.05M PH9.6包被缓冲液稀释为0μg/ml左右,于聚苯乙烯板孔内加0.ml,4℃**,次日以洗涤缓冲液洗涤3次。酶标记抗体用%BSA-PBS液依次稀释成∶00,∶200,∶400,∶800,∶600……(根据据抗体的滴度而定),分别加入反应孔中,每个稀释度二孔,每孔0.ml,37℃孵育小时后洗涤。然后加底物液,每孔0.ml,37℃0~30分钟。以2M H2SO4 0.05ml终止反应。
结果判定主要以ELISA比色仪读取各孔OD值。并以OD为纵座标,结合物浓度为横座标,绘制滴定曲线。由曲线上查得OD值为.0左右,且曲线斜率zui大时的酶标抗体稀释度,即为该标记物的工作浓度。
有关试验的试剂及器材均见TSZ Elisa试剂盒部分。
250G 盐酸胍 蛋白组学级 GUANIDINE HYDROCHLORIDE 8-88-9
500G 盐酸胍 蛋白组学级 GUANIDINE HYDROCHLORIDE 8-88-9
00G 溴酚蓝,钠盐 蛋白组学级 BROMOPHENOL BLUE SODIUM SALT 7720-78-7
50G 溴酚蓝,钠盐 蛋白组学级 BROMOPHENOL BLUE SODIUM SALT 7720-78-7
00MG 辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷 蛋白组学级 OCTYL-B-D-THIOGLUCOPYRANOSIDE 7720-78-7
G 辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷 蛋白组学级 OCTYL-B-D-THIOGLUCOPYRANOSIDE 7782-63-0
G 辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 蛋白组学级 OCTYL-B-D-GLUCOPYRANOSIDE 7782-63-0
500MG 辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 蛋白组学级 OCTYL-B-D-GLUCOPYRANOSIDE 7782-63-0
TSZ Elisa试剂盒