开云国际平台棋牌-唯一官方网站

技术文章

IL-22 Elisa试剂盒酶联免疫吸附测定类型与操作过程

点击次数：933 更新时间：2018-06-28

IL-22 Elisa试剂盒双抗体夹心法检查抗原
双抗体夹心法是检查抗原zui常用的办法，但要留意的是在一步法（待测抗原与酶标抗体一同参加反响）测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体，而不再构成“夹心复合物”呈现钩状效应，乃至可不显色而呈现假阴性成果。因而在使用一步法试剂测定标本中含量可反常增高的物质（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）时，应留意可测规模的zui高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。双抗体夹心法测抗原的另一留意点是类风湿因子（RF）的搅扰。RF是一种本身抗体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段。用作双抗体夹心法检查的血清标本中如富含RF，它可充任抗原成份，一同与固相抗体和酶标抗体，表现出假阳性反响。双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能构成两位点夹心。
双抗体夹心法的扼要操作过程为：
）先参加抗体，使抗体固定于载体外表；
2）再加样品，使目标检查抗原构成抗原-抗体复合物；
3）加酶标抗抗体（第二种动物抗抗原的酶标抗体）；
4）参加酶促反响底物，发作显色反响，显色的深浅与待测抗原的量成正比。
ELISA试剂盒竞赛法检查抗原
当小分子抗原或半抗原因缺少可作夹心法的两个以上的抗体位点，因而不能用双抗体夹心法进行测定，能够选用竞赛法形式。办法的基本原理可见图2，经洗刷后分成两组：一组加酶符号抗原和被测抗原的混合液，而另一组只加酶符号抗原，再经孵育洗刷后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的不知道抗原的量。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。
竞赛法的扼要操作过程：
）先参加抗体，使抗体固定于载体外表；
2）参加梯度浓度比例的待测样品与酶标抗原混合物,一同做只加酶标抗原的对照组；
3）参加酶促反响底物，发作显色反响，比照实验组及对照组的显色区别，计算不知道抗原的量。
双抗原夹心法检查抗体
IL-22 Elisa试剂盒双抗原夹心法的反响形式与双抗体夹心法相似。用特异性抗原进行包被和制备酶物，以检查相应的抗体。与间接法测抗体的不一样之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因而其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检查常选用本法。本法关键在于酶标抗原的制备，应根据抗原构造的不一样，寻觅适宜的符号办法。