小鼠ELISA试剂盒属固相免疫测定,抗原、抗体的联络只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,参与板孔中的标本,其间的抗原并不是都有对等的和固相抗联络的机遇,只需zui靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐,因此需经分散才能到达反应的结束。在这以后参与的酶符号抗体与固相抗原的联络也相同如此。这便是为何ELISA查看试剂盒反应老是需要一定时间的温育。
温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃(冰箱温度)等。37℃是试验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体联络的适合温度。在树立ELISA方法作反应动力学研究时,试验标明,两次抗原抗体反应通常在37℃经-2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜选用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中,以形成zui多的堆积。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中通常不予选用。
小鼠ELISA试剂盒的质量凹凸要素取决于这两个方面
.选材目标。
2.选材进程。
胎牛血清用于选材的胎牛应健康无病并且在的出生天数以内,选材进程应严峻按照操作规程实行,制备出的血清要经过严峻的质量判定。分外恳求有:
a.要经过滤膜过滤除菌,确保无菌;
b.证明所用血清中不含对所出产疫苗病毒的按捺物;
c.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家恳求无细菌噬菌体污染;
d.对细胞有出色的支持繁衍作用;
e.有必要来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具有恰当的监测系统。