Elisa试剂盒检测抗生素的原理
点击次数:671 更新时间:2019-10-28
氨基糖类、四环素类、喹诺酮类、硝基呋喃类等。目前国内外可以用ELISA方法检测的抗生素有:、、四环素、、呋喃它酮、、、泰乐菌素、磺胺喹恶啉、、盐霉素、磺胺类、阿维霉素、ELISA试剂盒检测成本低灵敏度高检测限通常可以达到*,是一种理想的初筛方法。但由于ELISA方法存在一定的假阳性率,因此用美联免疫吸附法测定的阳性样品必须做进一步的确定实验。
现在已ELISA试剂盒检测为例介绍;本试剂盒适用于牛奶、肉类、鱼、虾、血清、及蜂蜜中的残留量的测定。
(一)测定原理
测定的基础是抗原抗体放映。微孔板包被有针对兔IgG(抗体)的羊抗体。加入抗体、标记物、标准或样品溶液、游离与酶标记物竞争抗体,同时抗体与羊抗体连接。没有连接的酶标记物在洗涤步骤中被去除。将酶基质(过氧化尿素)和发色剂(四甲基联苯胺)加入到空中并且孵育。结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使眼色由蓝色转变为黄色。在450nm处测量,吸收光强度与样品中的浓度成正比
(二)试剂盒指标
特异性
通过对形影的物质进行交叉反应性分析得到
00%碱0.5%<0.05%
余四环霉素变暗霉素无交叉反应
回收率
牛奶>80%鱼虾肉>80%
蜂蜜>80%蛋类>80%
(三)提供的试剂
、96孔(2条*8孔)包被有羊抗体。
2、浓缩标准液;为标准溶液。
3、过氧化物酶标记的浓缩液:0.7mL
4、抗体浓缩液0.7ml
5、基质(7ml)含有氧化尿素
6、四甲基联苯胺(TMB)30%过氧化氢,牛血清白蛋白,图文20等
7、反应停止液mol/L硫酸
8、缓冲液:00ml用于标准酶标记物抗体样品稀释
9、缓冲液2:ml,用于测定牛奶样品时的标准稀释用缓冲液