羊N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶试剂盒实验结果计算
点击次数:834 更新时间:2020-05-07
羊N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)试剂盒(酶联免疫吸附试验法)操作步骤
. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体00μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育5min。
7. 每孔加入终止液50μL,5min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
试剂盒性能
. 检测范围:5 mU/mL – 60 mU/mL。
2. 灵敏度:zui低检测浓度小于.0 mU/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于0% ,板间变异系数小于5% 。