当前位置:首页 > 技术文章

技术文章

Elisa试剂盒的测试需要满足哪些要求?
点击次数:723 更新时间:2020-06-27
  Elisa试剂盒的测试要求:
 
  做好对照
 
  正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
 
  实验条件的选择
 
  在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
 
  () 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
 
  (2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 8~24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.、.0和0μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值较大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为~0μg/ml。
 
  (3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
 
  (4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以0-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
 
  进口分装:
 
  检测范围和灵敏度不同,用量少时,可使用分装,前期是它的长久性不是很好。
 
  试剂盒的标准曲线较高点OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.0以下。
 
  试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。
 
  试剂盒重复性好,板内、板间变异系数均<9 %。
 
  试剂的组份都多给20%的富余量,确保完成48/96孔的检测,避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。
 
  检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作,保证实验结果的重复性。
 
  白介素6是一种细胞因子,已被证实为B细胞分化因子.它是一种抗体形成系统,它的生理特性,如肝细胞急性蛋白合成的诱导和基于和白介素3协同作用的生长的刺激等,也备受关注. 并且已证实白介素-6与病理学存在稳定的相关关系.例如,报道多种疾病的生长因子为白介素-6, 骨髓瘤细胞能合成白介素-6并表达白介素-6受体.此外, 白介素6在多种炎性疾病和自身免疫疾病发挥重要的作用. 此试剂盒能高灵敏度的检测小鼠血清和细胞基质上清的白介素6 原理 此试剂盒运用了两种特异性抗体,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与小鼠的白介素-6的量成正比. 检测范围 0.94的 700 pg/mL 预期用途

分享到:

加入收藏 | 返回列表 | 返回顶部

©2024上海谷研实业有限公司 版权所有  总访问量:282399 Design By 环保在线 
主营:补体片断5aElisa试剂盒,花生四烯酸Elisa试剂盒,维生素DElisa试剂盒 GoogleSitemap   备案号:沪ICP备12048703号-8

联系人: 马先生
电话:
021-39921927,021-39596320
手机:
15026555973
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
 

环保在线

推荐收藏该企业网站
Baidu
map