豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA试剂盒技术原理
点击次数:634 更新时间:2020-09-10
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中豚鼠单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4)水平。用纯化的豚鼠单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4),再与HRP标记的单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中豚鼠单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4)浓度。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。