做到这些可减少Elisa试剂盒故障的发生!
点击次数:482 更新时间:2020-12-27
ELISA是指以酶作为标记物、以抗原和抗体之间免疫结合反应为基础的固相吸附测定方法。因此,一个ELISA测定试剂,其有机组成部分包括:包被的抗原或抗体的固相支持物,即聚苯乙烯塑料微孔或试管;酶标记的抗体或抗原和酶的反应底物等。
抗原或抗体的固相化,并不影响其免疫结合活性,酶标记的抗体或抗原亦是如此,并且标记酶的活性不因标记过程而丧失。整个测定中,医学|教育网搜集整理抗原与抗体的结合反应在固相支持物上进行,反应结果的判断,以酶与其底物作用后的显色或产生荧光或发光反应为标准,显色或产生荧光或发光的强度,与临床标本中待测物的浓度成正比或反比关系。目前国内的ELISA试剂盒均以酶的显色反应来完成测定。
Elisa试剂盒实验反应时间注意事项:
、在备孔稀释好待测样品和标准品;
2、上板:应从后一孔上完板开始计时,以确保反应时间;
3、加底物:应从加一孔开始计时,以确保加终止液时的反应时间是5分钟。
ELISA试剂盒注意事项:
、标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反响。保存过久可发作聚合在ELISA中可使本底加深。
2、冻住标本溶解后,蛋白质局部浓缩,散布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠混合,不要在混匀器上激烈震荡。
3、污浊或有沉积的标本应先离心或过滤,弄清后再检测。
4、反复冻融会使蛋白效价下降,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。