检测试剂盒操作步骤:
、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20-25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加入标准品/样本50ml 到对应的微孔中,然后加入抗体工作液50ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液(见配液8)250ml/孔,充分洗涤4-5次,每次间隔0s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、加酶标二抗:加入酶标二抗00ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应30min,取出重复洗板步骤6。
8、显色:加入底物液A液50ml/孔,再加底物液B液50ml/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应5min(见注意事项8)。
9、测定:加入终止液50ml/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。
结 果 判 定
白色药片变为蓝绿色或与空白对照卡相同,为阴性结果;白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果,不变蓝为强阳性结果,说明农yao残留量较高,显浅蓝色为弱阳性结果,说明农yao残留量相对较低。
对阳性结果的样品,可用其它分析方法进一步确定具体农yao品种和含量。