Elisa试剂盒应用的范围很广，而且正在不断地扩大，原则上Elisa试剂盒可用于检测一切抗原、抗体及半抗原，可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。
 

　　导致Elisa试剂盒实验失败的原因：
 

　　一、标本的影响
 

　　溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素)，在洗涤过程中往往难以*洗脱，它可使H2O2释放出原生态氧(O)，从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质，即显蓝色，产生假阳性。所以严重溶血标本禁用。
 

　　二、标本受细菌污染
 

　　因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶，因此，被细菌污染的标本同溶血标本样，亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。
 

　　三、标本保存不当
 

　　在冰箱中保存过久的标本，在间接法ELISA测定中会导致本底过深、造成假阳性；为克服上述干扰，ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集；如不能立即测定，5d内测定的血清标本可存放于4℃，周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混合后再测定，但混匀时应轻柔，不可强烈振荡。
 

　　四、标本凝固不全
 

　　在工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。