NF-KB检测试剂盒的组成及操作流程
点击次数:550 更新时间:2021-08-18
NF-KB检测试剂盒主要用于定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其他相关生物液体中的含量。
NF-KB检测试剂盒的组成:
.结合物及标本的稀释液;
2.洗涤液,在板式elisa中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
3.酶标记的抗原或抗体结合物;
4.酶的底物;
5.阴性对照品和阳性对照品定性测定中,elisa试剂盒参考标准品和控制血清定量测定中;
6.已包被抗原或抗体的固相载体免疫吸附剂;
NF-KB检测试剂盒的操作流程:
. 核转录因子 nf-kb 检测试剂盒(elisa)从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μl;
3. 样本孔中加入待测样本50μl;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根---化物酶hrp标记的检测抗体00μl,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液350μl,静置min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次也可用洗板机洗板。
6. 每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育5min。
7. 每孔加入终止液50μl,5min内,在450nm波长处测定各孔的od值。