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小鼠Smad7 elisa检测试剂盒操作步骤
点击次数:517 更新时间:2021-09-27

小鼠Smad7 elisa检测试剂盒操作步骤:

. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔0孔,在di一、第二孔中分别加标准品00μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟.

0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟。

人胃癌细胞;MKN-45

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2B

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2C

人肺粘液上皮样癌细胞;NCI-H292

人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞;OCM-A

人胃腺癌细胞;SGC-790 [SGC790]

人低分化肺腺癌细胞;SK-LU-

人乳腺导管癌细胞;ZR-75-30

人急性T淋巴细胞性白血病细胞;I 2.(CRL-2572)

人膀胱癌细胞;5637(HTB-9)

人肾透明细胞腺癌细胞;786-O [786-0]

人肾透明细胞癌;Caki-

人胰腺导管癌细胞;CFPAC-

人食管癌细胞;EC09

人结直肠腺癌细胞;HCT-5 [HCT5]

人结直肠腺癌细胞;LS 74T [LS74T]

人乳腺癌细胞;MDA-MB-468

人肺支气管癌细胞;NCI-H650

人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H975

人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H2087

人小细胞肺癌;NCI-H2227

人非小细胞肺癌细胞;NCI-H23

人肾上腺皮质腺癌细胞;NCI-H295R

小鼠源细胞

小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albino

小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)

小鼠骨髓细胞;FDC-P

小鼠垂体瘤细胞;GT-

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E

小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3

小鼠睾丸畸胎瘤细胞;P9

小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA2

小鼠血细胞;WEHI-3 [WEHI3]

小鼠成纤维细胞;φ2

小鼠红白血病细胞;MEL

小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag4

小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20

小鼠小胶质细胞;BV2

小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY

小鼠胚胎成纤维细胞;MEF


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