TPS 试剂盒标本激活方法:

1. 将450ul 标本稀释液加入到一支 1.5ml 进口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血浆标本。

2. 加20ul 1 N HC I ,盖紧，上下混匀。 2 － 8 ℃ 放置60± 2 分钟。

3. 加20ul 1 N NaOH, 盖紧，上下混匀。

4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保存3 天。计算结果时乘 以稀释倍数 50 。 （ 注意：不同的标本E2F1 的水平可能有较大差异，请根据实际情况灵活掌握稀释度）

5. 细胞培养上清或组织匀浆 10 倍稀释 (410ul 的标本稀释液＋ 50ul 样本＋ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。

结果计算与判断

1. 所有 OD 值都应减除空白值后再行计算。

2. 以标准品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。

3. 根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应 E2F1 含量 ，再乘上稀释倍数即可 。

试剂盒性能

1. 灵敏度 ： 最小的E2F1 检测浓度小于 15 pg/ml。

2. 特异性： 可同时检测重组或天然的人 E2F1 。 不与 人其它细胞因子有交叉反应。

3. 重复性：板内、板见变异系数均小于8.9％。

人骨肉瘤细胞；HOS

人慢性髓系白血病细胞；K562

人前列腺癌细胞；LNCaP

人乳腺癌细胞；MCF 7B

人急性淋巴母细胞性白血病细胞；MOLT-4

人小细胞肺癌细胞；NCI-H209

黑人Burkitt淋巴瘤细胞；RAJI

人B淋巴细胞瘤细胞；RAMOS

人B淋巴细胞瘤细胞；RAMOS(RA.1)

人脑瘤细胞；SF126

人脑瘤细胞；SF763

人脑瘤细胞；SF767

人皮肤黑色素瘤细胞；SK-MEL-1

人肾上腺皮质癌细胞；SW-13

人结直肠癌细胞；T84

人急性单核细胞白血病细胞；THP-1

人神经胶质细胞瘤细胞；U251

人组织细胞淋巴瘤细胞；U937 [U-937]

人胃腺癌细胞；BGC-823

人低分化肺腺癌细胞；GLC-82 [GLC82]

人喉癌上皮细胞；Hep-2

人纤维肉瘤细胞；HT-1080

人绒癌细胞；JEG-3

人耐VP16绒癌细胞株；JEG-3/VP16

白介素-2转染耐VP16绒癌细胞；JEG-3/VP16-IL-2

TNFa转染耐VP16绒癌细胞；JEG-3-VP16-TNFa

人急性T淋巴细胞白血病细胞；Jurkat, Clone E6-1

人神经母细胞瘤细胞；BE(2)-M17