Hcy Elisa试剂盒的运输工作
.简单,不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2.适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3.回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。
4.跟后续的实验兼容,包括2-D电泳、质谱测序等。
运输及保存 常温运输,4℃保存,有效期一年。
自备试剂 无
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Hcy Elisa试剂盒使用方法
. 按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2. 切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除,否则会影响回收效率)。注意:固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建议把样品分多孔上样,电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色,然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置,通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域,并切下此区域的胶进行回收。
3.将切下的胶块转移到.5 mL塑料离心管中。
4.用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5.加入200 uL溶液A,4℃摇晃洗脱至少2-6小时(夜)。此时将溶液B放在冰箱预冷。
6.0,000 g离心0分钟,转移上清到新的离心管中,注意不要吸取碎胶。
7.加入5倍体积的预冷的溶液B,摇晃混匀。
8.-20℃放置至少0-30分钟。
9.室温2,000 g离心5-20分钟,弃上清。
0.Hcy Elisa试剂盒室温充分晾干,得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中,可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。