猪转录因子AP- 酶联免疫elisa试剂盒保存

猪转录因子AP- 酶联免疫elisa试剂盒保存标本要求
．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中 先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟。
0. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。

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产品名称：
英文名称： AP- ELISA KIT
规格：96T/48T
存储条件：2-8℃
有效期：6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床 。

类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体，
②酶标记的抗原或抗体，
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）双抗体夹心法、
（二）一步法、
（三）间接法测抗体、
（四）竞争法。
技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则40nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.倍，即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则40nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.倍，即为阳性。

APP    重组人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-70, His & GST 标签)    BstXI
CD47    重组人 CD47 蛋白 (Fc 标签)    KspAI (HpaI)
TNFRSFB    重组人 TNFR2 / CD20b / TNFRSFB 蛋白 (aa -268, 96 Met/Arg, His 标签)    KspAI (HpaI)
PROC    重组人 PROC / Protein C / PROC 蛋白 (His 标签)    MnlI
IL2A & IL27B    重组人 IL2A & IL27B Heterodimer 蛋白    MnlI
ITGA5 & ITGB6    重组人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白    BseDI (BsaJI)
EDEM2    重组人 EDEM2 / C20orf3 蛋白 (His 标签)    BseDI (BsaJI)
DCUND    重组人 DCUND / SCCRO 蛋白 (His 标签)    PauI (BssHII)
ARF5    重组人 ARF5 / ADP-ribosylation factor 5 蛋白 (His 标签)    PauI (BssHII)
CBR3    重组人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白 (His 标签)    HphI
STX3    重组人 STX3 / Syntaxin 3 蛋白 (His 标签)    HphI
MAPRE3    重组人 MAPRE3 / EB3 蛋白 (His 标签)    RsaIZamboni 固定液    250 mL    
CAS59-43-8    维生素 B    0g
2-000-5     成骨细胞生长因子    5mL
20720-50    柱式冻存血液 DNAout    50 次
醛缩酶    00mg    
dCTP 溶液，00mM    0.5mL    
RNase-free Tris HCl,M,pH 8.5    00mL    
RecJf 核酸外切酶    000U    
CAS590-46-5    甜菜碱盐    00g
2-265    EBY00 酵母菌种    mL
一管式拭子 DNAout    20 次    
可逆性铜染试剂盒    套    
葡聚糖 T-0    0g    
F2K 培养基 ( 含 % 双抗 )    500mL    
柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒    50 次    
05-500    MTT 检测试剂盒    500 次
70503T-50    DNA 电泳分子量标准 (250-500 bp)    50 次
化蛋白 G    0.5mg