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产品名称:猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫elisa试剂盒规格
英文名称: NGAL ELISA Kit
规格:96T/48T
存储条件:2-8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 。
猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫elisa试剂盒规格类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体,
②酶标记的抗原或抗体,
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法、
(二)一步法、
(三)间接法测抗体、
(四)竞争法。
猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫elisa试剂盒规格标本要求
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟。
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫elisa试剂盒规格技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
SCN2B 重组人 SCN2B 蛋白 (His 标签) OliI (AleI)
LILRA3 重组人 ILT6 / LILRA3 蛋白 (His 标签) SatI (Fnu4HI)
IGSF8 重组人 PGRL / IGSF8 蛋白 (His 标签) SatI (Fnu4HI)
CD33 重组人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 标签) TauI
REG4 重组人 REG4 / RELP / GISP 蛋白 (Fc 标签) TauI
CDH2 重组人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 标签) FspAI
TSPAN8 重组人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 标签) FspAI
TNFSF 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF / CD254 蛋白 (Fc 标签) Nb.Bpu0I
BIRC5 重组人 Survivin / BIRC5 / API4 蛋白 DpnI
NCF2 重组人 NCF2 / NCF-2 / P67phox 蛋白 DpnI
GALE 重组人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白 (His 标签) DpnI
ETHE 重组人 ETHE / HSCO 蛋白 (His 标签) BseJI (BsaBI)
PFN2 重组人 Profilin 2 / PFN2 蛋白 (His 标签) HpyF0VI (MwoI)
PRKARA 重组人 PRKARA / PRKAR / PKR 蛋白 (His 标签) HpyF0VI (MwoI)
GADD45G 重组人 GADD45G / CR6 蛋白 BveI (BspMI)
NRNL 重组人 NRNL / neuritin -like / Cpg5-2 蛋白 (Fc 标签) PfoI脱氢酶 3000U
ROS 活性氧检测试剂盒 00 T
CAS900-2- 胶原酶Ⅲ型 00mg
35-300 山羊抗人 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记 300μL
7040-50 软骨 RNAout 50 次
n- 十二烷基 -β-D- 麦芽糖苷 g
4mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD) 个
上皮细胞生长因子 5mL
电泳尿素 00g
2-0330-5 少突胶质前体细胞生长因子 5mL
0223-00 RNA EDTA·2Na ( 乙二胺四二 ) 00g
PLPD 固定液 250 mL
猪中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫elisa试剂盒规格BglII 500U
L-NAME(eNOS 抑制剂 ) 200mg
端粒酶重复片段扩增试剂盒 (TRAP) 50 次
23-0450-0.5 LPS(TLR4 激活剂 ) 0.5mg
60705-50 一管式植物 DNAout 50 次
RNA Oligo(dT) 纤维素 25mg
Cy5-dCTP 溶液,0mM 25μL