猪粘膜血管地址素细胞黏附分子（MADCAM）酶联免疫elisa试剂盒保存

猪粘膜血管地址素细胞黏附分子(MADCAM)酶联免疫elisa试剂盒保存标本要求
．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中 先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟。
0. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。

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产品名称：猪粘膜血管地址素细胞黏附分子(MADCAM)酶联免疫elisa试剂盒保存
英文名称： MADCAM ELISA kit
规格：96T/48T
存储条件：2-8℃
有效期：6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床 。

猪粘膜血管地址素细胞黏附分子(MADCAM)酶联免疫elisa试剂盒保存类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体，
②酶标记的抗原或抗体，
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）双抗体夹心法、
（二）一步法、
（三）间接法测抗体、
（四）竞争法。
猪粘膜血管地址素细胞黏附分子(MADCAM)酶联免疫elisa试剂盒保存技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则40nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.倍，即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则40nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.倍，即为阳性。

CASQ    重组人 Calsequestrin- / CASQ 蛋白    FastDigest® SspI
DNAJC30    重组人 DNAJC30 蛋白 (His 标签)    FastDigest® Sau3AI (Bsp43I)
SRGN    重组人 Serglycin / SRGN 蛋白 (His 标签)    FastDigest® HinfI
NCKIPSD    重组人 NCKIPSD / SPIN90 蛋白 (GST 标签)    FastDigest® MboI
BMF    重组人 BMF / Bcl2 modifying factor 蛋白 (His 标签)    FastDigest® MboII
ALDH4A    重组人 ALDH4A 蛋白    FastDigest® AflII (BspTI)
KEAP    重组人 KEAP / INRF2 蛋白    FastDigest® BsiWI (Pfl23II)
HDAC4    重组人 HDAC4 蛋白 (aa 62-084)    FastDigest® BseGI
DCLK    重组人 DCAMKL / DCLK 蛋白    FastDigest® BseNI
VRK    重组人 VRK 蛋白    FastDigest® BsiEI (Bsh285I)
RHEB    重组人 RHEB 蛋白 (His 标签)    FastDigest® Acc65I
CCNE    重组人 CCNE / Cyclin-E 蛋白    FastDigest® AseI (VspI)
APOA    重组人 APOA / ApoAI 蛋白 (His 标签)    FastDigest® Bsh236I
MAP2K6    重组人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白 (207 Asp, 2 Asp)    FastDigest® Bsp407I
MAP2K6    重组人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 蛋白    FastDigest® Bsp407I4mL DNA 离心超滤管 (9-5 KD)    个    
40633-000    荧光法死细胞检测试剂盒    000 次
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弹性蛋白酶    5mg    
CAS9032-75-    离析酶 R-0    g
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