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猪粘蛋白/粘液素(MUC)酶联免疫elisa试剂盒保存标本要求
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟。
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
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产品名称:猪粘蛋白/粘液素(MUC)酶联免疫elisa试剂盒保存
英文名称: MUC ELISA Kit
规格:96T/48T
存储条件:2-8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 。
猪粘蛋白/粘液素(MUC)酶联免疫elisa试剂盒保存类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体,
②酶标记的抗原或抗体,
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法、
(二)一步法、
(三)间接法测抗体、
(四)竞争法。
猪粘蛋白/粘液素(MUC)酶联免疫elisa试剂盒保存技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
RIP2 重组人 CRIP2 蛋白 (His & GST 标签) FastDigest® AccI (XmiI)
ASFB 重组人 ASFB 蛋白 (His 标签) FastDigest® NmuCI
MAPLC3A 重组人 LC3A / MAPLC3A 蛋白 (His 标签) FastDigest® NaeI (PdiI)
NAA0 重组人 NAA0 / ARDA 蛋白 (His & GST 标签) FastDigest® PdmI
GSTZ 重组人 GSTZ 蛋白 (His 标签) FastDigest® PsuI
AIF 重组人 IBA / AIF 蛋白 (His 标签) FastDigest® AvrII (XmaJI)
GNAZ 重组人 PFK / PFKM 蛋白 (His & GST 标签) FastDigest® Hpy8I
PRTFDC 重组人 PRTFDC 蛋白 (His 标签) FastDigest® AleI (OliI)
DPEP2 重组人 DPEP2 / MBD-2 蛋白 (His 标签) FastDigest® Fnu4HI (SatI)
BPHL 重组人 BPHL 蛋白 (His 标签) FastDigest® TauI
DPEP 重组人 Dehydropeptidase-I / DPEP 蛋白 (His 标签) FastDigest® FspAI
PGC 重组人 Pepsinogen C / PGC 蛋白 (His 标签) FastDigest® DpnI
TGFBR 重组人 TGFBR / ALK-5 / SKR4 蛋白 (aa 200-503, His & GST 标签) FastDigest® DpnI
USP30 重组人 Ubiquitin specific peptidase 30 / USP30 蛋白 (SUMO 标签) FastDigest® BsaBI (BseJI)核酸外切酶 III 2500U
20895-200 大鼠白细胞分离液 .084 200mL
40449-50 柱式微生物基因组 DNAout 50 次
Rosetta-gami B(DE3)plysS 菌种 mL
成骨细胞生长因子 5mL
T4 DNA 连接酶 000U
猪粘蛋白/粘液素(MUC)酶联免疫elisa试剂盒保存人胰岛细胞分离液 .056 200mL
8-0280-00 过氧化物酶检测试剂盒 00 次
9037-30 一站式 DNA 尿素 -PAGE 电泳套装 30 次
三合一 RNA 上样液 ( 含 EB) .5mL
DNA 非变性 PAGE 上样液 .5mL
柱式 DNA PAGE 胶回收试剂盒 50 次
AH09 酵母菌种 mL
3068-300 T7 DNA 聚合酶 ( 未修饰 ) 300U