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小鼠神经生长因子前体(proNGF)酶联免疫elisa试剂盒保存标本要求
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟。
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
小鼠神经生长因子前体(proNGF)酶联免疫elisa试剂盒保存保证产品质量,*,质量可靠,灵敏度高,效果稳定。等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。
产品名称:小鼠神经生长因子前体(proNGF)酶联免疫elisa试剂盒保存
英文名称: proNGF ELISA kit
规格:96T/48T
存储条件:2-8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 。
小鼠神经生长因子前体(proNGF)酶联免疫elisa试剂盒保存类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体,
②酶标记的抗原或抗体,
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法、
(二)一步法、
(三)间接法测抗体、
(四)竞争法。
小鼠神经生长因子前体(proNGF)酶联免疫elisa试剂盒保存技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
HSF 重组人 HSF / HSTF 蛋白 (His 标签) HSF
CST 重组人 Cystatin SN / CST 蛋白 (His 标签) CST
CD64 重组人 CD64 / Endolyn 蛋白 (His 标签) CD64
EPHA4 重组人 EphA4 蛋白 (His & Fc 标签) EPHA4
A2M 重组人 A2M / CPAMD5 / Alpha-2-macroglobulin 蛋白 (His 标签) A2M
CSF 重组人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF- 蛋白 (His 标签) CSF
SULTA 重组人 SULTA / STP 蛋白 (His 标签) SULTA
CCL7 重组人 CCL7 / TARC / SCYA7 蛋白 (His 标签) CCL7
MICA 重组人 MICA 蛋白 (His 标签) MICA
FABP2 重组人 FABP2 / I-FABP 蛋白 (His 标签) FABP2
DDOST 重组人 DDOST / OST48 蛋白 DDOST
EPOR & CD3 重组人 EPOR & CD3 Homodimer 蛋白 EPOR & CD3
FLRT2 重组人 FLRT2 蛋白 (His 标签) FLRT230990-50 酵母 DNAout 50 次
RNase A 干粉 500mg
超培养基 00mL
氯溶液 ,25mg/mL 0mL
羧苄青溶液 ,50mg/mL mL
30598-00 海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒 00 次
80934C-0 TE 缓冲液,PH8.0 0mL
Southern 细菌 (G-)DNAout 0 次
dITP 溶液,00mM 0.5mL
小鼠神经生长因子前体(proNGF)酶联免疫elisa试剂盒保存即用型 PCR 试剂盒 2.0 mL
C43(DE3) 菌种 mL
30404-0 克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成试剂盒 0 次
902-00 低载量 PCR 片段纯化试剂盒 00 次
双荧光素酶报告基因检测试剂盒 00 次
大鼠粒细胞分离液 .9 200mL
DH5α 化学感受态细胞 0.mL×0
抗Ⅲ,0mg/mL mL