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小鼠的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫elisa试剂盒保存标本要求
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟。
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
小鼠的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫elisa试剂盒保存保证产品质量,*,质量可靠,灵敏度高,效果稳定。等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。
产品名称:
英文名称:Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit
规格:96T/48T
存储条件:2-8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 。
类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体,
②酶标记的抗原或抗体,
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法、
(二)一步法、
(三)间接法测抗体、
(四)竞争法。
技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
对甲胺蓝(BCIP) 英文名称: Toluidineblue(BCIP) : 6578/6/9 分子式: 433.62 分子量: C8H6BrCINO4PC7H9N
对甲酚 英文名称: Paracresol : 06-44-5 分子式: 08.4 分子量: C7H8O
对甲磺酸2,6-二甲吡鎓盐 分子式: 279.35 分子量: C4H7NO3S 英文名称: P-toluenesulfonicacid2,6-twomethylpyridiniumsalt : 76h
对甲磺酰 分子式: 86.23 分子量: C7H0N2O2S;CH3C6H 英文名称: Paratoluenesulfonicacid : 576-35-8
对甲氧甲酰 分子式: 66.8 分子量: C8H0N2O2 英文名称: Onthemethylgroupofthe : 3290-99-
对甲氧偶氮 分子式: 22.25 分子量: C3H2N2O 英文名称: Onmethoxyazobenzene : 2396-60-3
对克利西丁--对磺偶合剂 英文名称: ToCliffordXiding-p-aminobenzenesulfonatecouplers : 40947-69- 分子式: 32.35 分子量: C4H5N3O4S
对氯苄并咪唑 分子式: 242.7 分子量: C4HClN2 英文名称: P-chlorobenzylbenzimidazole : 5468-66-6
对氯碘 分子式: 238.45 分子量: C6H4ClI 英文名称: Thechlorineiodobenzene : 637-87-6
对氯酚 英文名称: Parachlorophenol : 06-48-9 分子式: 28.56 分子量: C6H5OCl
对氯甲 英文名称: Chlorinetoluene : 06-43-4 分子式: 26.59 分子量: C7H7Cl
对氯甲并噁唑 分子式: 243.69 分子量: C4H0ClNO 英文名称: Thechloromethylphenylbenzoxazole : 57864-9-4
对氯三氟甲 分子式: 80.6 分子量: C7H4ClF3 英文名称: Tothreef : 98-56-6
对氯三氟甲氧 分子式: 96.55 分子量: C7H4ClF3O 英文名称: Onthechlorinethree : 46-8-4免疫蛋白清除剂 20 次
*0 化学感受态细胞 0.mL×0
山羊抗小鼠 IgG(H+L),异硫氰酸荧光素标记 00 μL
抗Ⅲ,0mg/mL mL
葡聚糖 T-40 0g
DNA Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸 ) 00g
阿拉伯树胶粉 00g
TE 缓冲液,PH7.0 0mL
g
山羊抗兔 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记 000μL
L- 乳酸脱氢酶 ( 兔肌 ) 2.5ku
DTT,免称量蛋白 48 管
2-262 Y089 菌种 mL