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产品名称:小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶联免疫elisa试剂盒规格
英文名称: Acta2/Actsa/Actvs ELISA kit
规格:96T/48T
存储条件:2-8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 。
小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶联免疫elisa试剂盒规格类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体,
②酶标记的抗原或抗体,
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法、
(二)一步法、
(三)间接法测抗体、
(四)竞争法。
小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶联免疫elisa试剂盒规格标本要求
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟。
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶联免疫elisa试剂盒规格技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
酚 英文名称: Kaempferol : 520-8-3 分子式: 286.2363 分子量: C5H0O6
酚红钠 英文名称: Phenolsodium : 34487-6- 分子式: 376.36 分子量: C9H3NaO5S
酚硫杀 英文名称: Phenolsulfur : 2539-90-8 分子式: 244.74 分子量: CH3ClO2S
酚葡萄糖醛苷 英文名称: Kaempferolglucuronide : 22688-78-4 分子式: 462.36042 分子量: C2H8O2
英文名称: Phenolphthalein : 77-09-8- 分子式: 38.33 分子量: C20H4O4
标准溶液 英文名称: Phenolphthaleinstandardsolution : 977/9/8 分子式: 38.33 分子量: C20H4O4
单磷二环己胺盐 英文名称: Phenolphthaleinmonophosphatedicyclohexylaminesalt : 485-59-9 分子式: 596.65 分子量: C20H5O7P·2C6H
络合剂 英文名称: Phenolphthalexone : 25296-54-2 分子式: 608.55 分子量: C30H28N2O2
酚紫 英文名称: Phenolviolet : 分子式: 分子量:
粉防已碱 英文名称: Powderantialkali : 分子式: 分子量:
粉唑 英文名称: Flutriafol : 76674-2-0 分子式: 30.29 分子量: C6H3F2N3O组蛋白 3. 小鼠单抗 30μL
台盼蓝 5g
90602G-50 DNA 电泳分子量标准 (3)pBR322/BstN I 50 次
2030-000 T7 RNA 聚合酶 000U
822B-30 一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 中 pH) 30 次
3002-0 AP 标记的抗抗体 0μL
CAS5086-94-9 伊红 Y, 醇溶性 0g
小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)酶联免疫elisa试剂盒规格克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成试剂盒 0 次
CAS606-2-4 琥珀酸,六水 25g
7-0050 EcoRI 2000U
F2K 液体培养基 ( 无血清和双抗 ) 500mL
非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 ) 00mL
COX IV 小鼠单抗 00 μL
酵母蛋白酶抑制剂 mL
DNA 上样液 ( 红 ),6× 0mL
DNA GuSCN( 异硫氰酸胍 ) 00g