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小鼠白三烯E4(LTE4)酶联免疫elisa试剂盒保存标本要求
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟。
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
小鼠白三烯E4(LTE4)酶联免疫elisa试剂盒保存保证产品质量,*,质量可靠,灵敏度高,效果稳定。等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。
产品名称:小鼠白三烯E4(LTE4)酶联免疫elisa试剂盒保存
英文名称: LT-E4 ELISA Kit
规格:96T/48T
存储条件:2-8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 。
小鼠白三烯E4(LTE4)酶联免疫elisa试剂盒保存类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体,
②酶标记的抗原或抗体,
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法、
(二)一步法、
(三)间接法测抗体、
(四)竞争法。
小鼠白三烯E4(LTE4)酶联免疫elisa试剂盒保存技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
英文名称: Muskgrassphenol : 89-83-8 分子式: 50.22 分子量: C0H4O
蓝 英文名称: Muskgrassphenolblue : 76-6-9 分子式: 466.59 分子量: C27H30O5S
砷铁 分子式: 205.69 分子量: As2Fe 英文名称: Arseniciron : 2006-2-2
升麻素 英文名称: Cimifugin : 3792-38-3 分子式: 306.32 分子量: C6H8O6
升麻素苷 英文名称: Prim-o-glucosylcimifugin : 8068-45-4 分子式: 468.452 分子量: C22H28O
生根粉 英文名称: Rootingpowder : 9873982 分子式: 分子量:
酰 分子式: 258.34 分子量: C0H8N4O2S 英文名称: Bio-Hydrazine : 66640-86-6
圣草次苷 英文名称: TimeofSt : 3463-28-0 分子式: 596.53398 分子量: C27H32O5
十八烷 分子式: 330.59 分子量: C24H42 英文名称: Eighteenbenzene : 4445/7/2
十二环吗啉 分子式: 28.48 分子量: C8H35NO 英文名称: Twelvemorpholinering : 593-77-7
十二氯三钛铝 分子式: 596.2 分子量: AlCl2Ti3 英文名称: Twelvechlorinethreetitanium : 2003-3-3
十二烷(硬型)(支链异构体类的混合物) 分子式: 246.43 分子量: C8H30 英文名称: Twelvealkyl(hard)(mixtureofbranchedchainisomers) : 25265-78-5
十二烷氯吡 分子式: 283.8798 分子量: C7H30ClN 英文名称: Twelvealkylchloride : 39549-68-
十二烷溴吡 分子式: 328.33 分子量: C7H30BrN 英文名称: Twelvealkylbromide : 04-73-4
十九 英文名称: Nineteenacid : 646-30-0 分子式: 298.5 分子量: C9H38O2
十六氟酞菁铜 分子式: 863.93 分子量: C32CuF6N8 英文名称: 十六氟酞菁铜 : 496-87-ATP 硫酸化酶 0U
电泳尿素 00g
蛋白去除试剂 S 3g
4- 甲基伞形酮 0g
DNA 电泳分子量标准 (3)φX74 DNA/Hinc Ⅱ 50 次
预染蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0 KD) 0 次
T4 RNA 连接酶 000U
卵白蛋白标准品,2mg/mL mL
小鼠白三烯E4(LTE4)酶联免疫elisa试剂盒保存克必隆 RACE 试剂盒 0 次
30525- 蛋白磷酸酶抑制剂混合液 2 mL
00873-00 电泳尿素 00g
柱式植物油 DNAout 50 次
008-50 非酶多糖清除剂 (DNA ) 50 次
CAS4306-25-3 植酸 0g
30602-00 Vent DNA 聚合酶 00U
00868-500 SDS-PAGE 分离胶配胶液 500mL
CAS0043-35-3 硼酸 500g