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小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)酶联免疫elisa试剂盒保存标本要求
.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟。
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)酶联免疫elisa试剂盒保存保证产品质量,*,质量可靠,灵敏度高,效果稳定。等优点已经得到广大客户的认可,您可放心,且我司有专门的售后部门对您进行全线跟踪。
产品名称:小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)酶联免疫elisa试剂盒保存
英文名称: BACE ELISA Kit
规格:96T/48T
存储条件:2-8℃
有效期:6个月
特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 。
小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)酶联免疫elisa试剂盒保存类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体,
②酶标记的抗原或抗体,
③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
(一)双抗体夹心法、
(二)一步法、
(三)间接法测抗体、
(四)竞争法。
小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)酶联免疫elisa试剂盒保存技术流程:
一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
、用缓冲液将抗体稀释至-0ug/ml。在反应孔中加0.ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
二、间接法(检测未知抗体)
、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则40nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.倍,即为阳性。
4,6-二羟-2-甲硫嘧 分子式: 58.8 分子量: C5H6N2O2S 英文名称: 4,6-twohydroxy-2- : 29639-68-7
4-吡 分子式: 04. 分子量: C6H4N2 英文名称: 4-cyanopyridine : 00-48-
4-苄硫代吗啉,-二氧物 分子式: 225.3 分子量: CH5NO2S 英文名称: 4-benzylthiomorpholine,-dioxide : 26475-66-
4-对三联 分子式: 245.33 分子量: C8H5N 英文名称: 4-aminogroupthree : 7293-45-0
4-氯-2-甲-噻吩[3,2-D]嘧 分子式: 84.646 分子量: C7H5ClN2S 英文名称: 4--2-methylthiophene[3,2-D] : 39442-6-5
4-氯-2-硝甲酸 分子式: 20.56 分子量: C7H4ClNO4 英文名称: 4-chloride-2- : 6280-88-2
4-溴-2-乙--碘 分子式: 30.96 分子量: C8H8BrI 英文名称: 4--2---iodobenzeneethylbromide : 75278-30-5
5--2-氯甲-,3,4-噁二唑 分子式: 分子量: C9H7ClN2O 英文名称: 5-phenyl-2--,3,4-two : 33575-83-6
5--2-硝三氟甲 分子式: 206.2 分子量: C7H5F3N2O2 英文名称: 5-amino-2-nitrothreef : 393--3
5-碘-6-甲尿嘧 分子式: 252.0 分子量: C5H5IN2O2 英文名称: 5-iodine-6-methyluracil : 46-67-2
5-硝-,0-菲咯啉 分子式: 225.2 分子量: C2H7N3O2 英文名称: 5-nitro-,0- : 499-88-6
5-溴-2,3-二氯吡 分子式: 226.89 分子量: C5H2BrCl2N 英文名称: 5--2,3-two : 97966-00-2
6-氯-3-吡硼酸甲亚二乙酸酯 分子式: 分子量: 英文名称: 6-chloro-3-pyridineboratemethyliminotwoacetate : 257642-7-9非冻型血液 DNA 保存液 00mL
动态显色法内毒素定量试剂盒 48 次
JM09(DE3) 菌种 mL
NMY5 酵母菌种 mL
D- 核糖 5g
D- 氨基葡萄糖盐 0g
一步法质粒 DNAout 2.0 50 次
2,3,5 氯化三苯基四氮唑 g
人内皮细胞分离液 .060 200mL
接头 DNA(Hind Ⅲ -Sma I) 5nmol
小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)酶联免疫elisa试剂盒保存DL- 苹果酸 00g
马来酸 0g
60807-50 柱式无内毒素质粒 DNAout 50 次
乙腈 25mL
Southern Marker Oligo( ) 20 次
904B-00 Denhardt 溶液,50× 00mL
20909-200 小鼠瘤细胞分离液 .070 200mL