人椎间盘髓核细胞培养

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人椎间盘髓核细胞【HumanIntervertebralDisc:NucleusPulposusCells】
     人椎间盘髓核细胞培养 产品描述：椎间盘细胞可以合成和分泌细胞外基质成分并调控细胞外基质成分有序合理的组织，从而使椎间盘行使正常功能。公司提供的人椎间盘髓核原代细胞均来自新鲜组织，用于培养人椎间盘髓核原代细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司产品人椎间盘髓核细胞培养试剂盒(HumanIntervertebralDiscPrimaCell™:NucleusPulposusCellsCatNo.3-005)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，人椎间盘髓核原代细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
培养步骤：
人椎间盘髓核细胞培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

人脂肪细胞*培养基百脉根根瘤菌 Rhizobium loti

拟囊体侧耳 Pleurotus cystidiosus胶原酶(含0mL酶解缓冲液)

小鼠成肌细胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori

荧光威客酵母 Wickerhamia fluorescensOne Step Western Kit HRP (Mouse)/一步法快速WB(HRP)试剂盒(鼠)

枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis嗜水气单胞菌 Aeromonas hydrophila

HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞)大豆慢生根瘤菌

中国台湾根霉 Rhizopus formosensis人晶体上皮细胞

苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人眼脉络黑色素瘤细胞棒杆菌Ⅹ型 Agrobacterium tumefaciens

EC09，人食管细胞苏云金芽胞杆菌山东亚种 Bacillus thuringiensis subsp. shandongiensis

人椎间盘髓核细胞培养3--2-氯-5-甲吡分子式：42.59英文名称：3- amino -2- -5-：34552-3-分子量： C6H7ClN2

硫酸甲酯钾分子式：50.2英文名称：Potassium methyl sulfate：562-54-9分子量： CH3KO4S

2,8-二三氟甲-4-羟喹啉分子式：28.5英文名称：2,8- two or three hydroxy -4-：35853-4-9分子量： CH5F6NO

3,6-二咔唑分子式：39.4英文名称：3,6- two phenyl carbazole：56525-79-2分子量： C24H7N

吡分子式：79.英文名称：Pyridine：0-86-分子量： C5H5N

3-氯-4-硝甲分子式：7.58英文名称：3- -4- nitro toluene：38939-88-7分子量： C7H6ClNO2

-乙烷-4-[4-正己乙炔]分子式：290.44英文名称：- -4-[4- ethyl hexyl phenyl ethynyl] benzene：7923-34-9分子量： C22H26

5-溴喹啉分子式：208.06英文名称：5- bromide：4964-7-0分子量： C9H6BrN

硫酸亚钛溶液分子式：383.92英文名称：Titanium sulfate solution：0343-6-0分子量： O2S3Ti2

4-甲-5-乙酰噻唑分子式：4.9088英文名称：4甲- 5 -乙酰噻唑：38205-55-9分子量： C6H7NOS

注意事项：
. 接收到人椎间盘髓核细胞培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。