人神经小胶质细胞说明书

注意事项：
. 接收到人神经小胶质细胞说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

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人神经小胶质细胞【HumanBrain:NormalNerveMicroglia
    人神经小胶质细胞说明书 产品描述：人神经小胶质细胞分离自正常人小脑组织，主要功能：（）神经胶质出现在大脑发育早期向成熟阶段转化的过程中。（2）当程序性细胞死亡时，或在大脑发育的过程中，中枢神经系统受损或受到病理损坏时，神经胶质可做为大脑的巨噬细胞。（3）胶质细胞能在II类组织相容性复合体表达CD-4阳性Ｔ细胞时表达抗原，能进行Fc介导的巨噬作用，并且与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。公司提供的人神经小胶质细胞均来自新鲜组织，用于培养人神经小胶质细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司产品人神经小胶质细胞培养试剂盒(HumanBrainPrimaCell™:NormalNerveMicrogliaCatNo.3-0484)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，人神经小胶质细胞传2代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

皮状丝孢酵母 Trichosporon cutaneum泡盛曲霉 Aspergillus awamori

Ampicillin(00mg/ml,000X)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠膀胱上皮细胞*培养基透质酸酶(含00mL酶解缓冲液)

费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii百脉根根瘤菌 Rhizobium loti

NCI-H2227(人小细胞肺细胞)OS-RC-2(人肾细胞)

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii植物杆菌 Lactobacillus plantarum

克鲁斯假丝酵母 Candida krusei双孢蘑菇

小鼠前列腺上皮细胞*培养基新生儿表皮角化细胞*培养基

大鼠骨细胞*培养基人真皮淋巴上皮细胞*培养基

铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa扣囊复膜孢酵母 Saccharomycopsis fibuligera

人神经小胶质细胞说明书4,5-二-6-羟嘧分子式：26.2英文名称：4,5- two hydroxy -6-：672-50-0分子量： C4H6N4O

毛蕊花糖苷英文名称：Mao Ruihua glycosides分子式：624.59分子量：C29H36O5：6276-7-3

阿曲汀英文名称：Achty分子式：326.43分子量： C2H26O3：55079-83-9

6-溴靛红英文名称：Isatin 6- bromide分子式：226.03分子量： C8H4BrNO2：77603-45-3

2-Boc-硫代-4,6-二甲嘧分子式：240.32英文名称：2-Boc- -4,6- two：4840-28-2分子量： CH6N2O2S

5-溴-2-甲氧嘧分子式：89.0英文名称：5- -2-, a：400-66-2分子量： C5H5BrN2O

4-羰-四甲氧自由分子式：70.23英文名称：4- - four methyl piperidine carbonyl oxygen free radical：2896-70-0分子量： C9H6NO2

盐酸非那吡分子式：249.7英文名称：Non pyridine hydrochloride：36-40-3分子量： CHN5.ClH

2,3-双(4-甲氧)-5-(4-)氯四氮唑分子式：49.87英文名称：Double 2,3- (4- methoxyphenyl) -5- (4- - phenyl) tetrazolium chloride：zx0分子量： C22H8ClN5O2

二甲亚砜-3C2分子式：80.5英文名称：Two methyl -3C2：3632-5-8分子量： C2H6OS

培养步骤：
人神经小胶质细胞说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。