大鼠气管和支气管上皮细胞培养

注意事项：
. 接收到大鼠气管和支气管上皮细胞培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

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大鼠气管和支气管上皮细胞【RatAirway:NormalBronchialandTrachealEpithelialCells】
    大鼠气管和支气管上皮细胞培养 产品描述：呼吸道上皮细胞是由纤毛、无纤毛和能分泌黏液的细胞按照从近端到远端呼吸道分布的混合细胞群组成。这类细胞的各个亚型细胞各具特点，从而不仅能形成物理屏障，可有效的防止多种有毒物质，而且通过产生和分泌大量化学介质和细胞因子形成高度复杂的宿主防御系统。支气管上皮由表面的上皮细胞和粘液腺体组成。表面的上皮细胞由基细胞，杯状细胞和纤毛细胞三种细胞构成，形成了基底柱状结构，并能清除粘液纤毛。用支气管上皮细胞培养分化诱导纤毛表型的研究显示，IL-4和IL-3的刺激能改变增殖、纤毛运动、黏液分泌等一系列细胞功能。支气管上皮细胞增殖以及其它细胞过程也部分受到EGF受体信号的调节。支气管上皮细胞的培养为我们研究这类细胞的功能和病理生理机制提供了一个体外模型。公司提供的大鼠气管和支气管上皮细胞，均来自新鲜组织。细胞的培养采用公司产品大鼠气管和支气管上皮细胞培养试剂盒(RatAirwayPrimaCell™:NormalBronchialandTrachealEpithelialCellsCatNo.3-7064)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，大鼠气管和支气管上皮细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。​

CTLL-2(小鼠T细胞)贝叶多孔菌

爪哇根霉 Rhizopus javanicus人非小细胞肺细胞

恶臭假单胞菌 Pseudomonas putida葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus小檗碱

链轮枝菌 Streptoverticillium sp.大鼠小肠粘膜上皮细胞*培养基

Western Blot封闭液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)异常汉逊酵母 Hansenula anomala

暂无 Brevibacterium thiogenitalis泾阳链霉菌 Streptomyces jingyangensis

肺形侧耳(凤尾菇) Pleurotus pulmonariusNCI-H76(人结直肠腺细胞)

神经母细胞瘤融粘帚霉 Gliocladium deliguescens

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

大鼠气管和支气管上皮细胞培养4，5-二嘧分子式：0.2英文名称：4, 5- two：3754-9-3分子量： C4H6N4

,4-二(3-甲氧氧)分子式：322.36英文名称：,4- two (3- a) benzene：5024-84-0分子量： C20H8O4

-甲-4-吡唑分子式：208英文名称：甲- 4 -吡唑：39806-90-分子量： C4H5IN2

分子式： 29,63英文名称：The Ordovician：6773-42-5分子量： C7H0CIN3O3

2-甲-5-溴吡分子式：72.02英文名称：2- methyl -5-：3430-3-5分子量： C6H6BrN

5-溴-2-氟吡分子式：75.99英文名称：5- bromide -2-：766--0分子量： C5H3BrFN

3,4,5-三氯吡分子式：82.44英文名称：3,4,5- three：3326-52-3分子量： C5H2Cl3N

硝酸布康唑分子式：474.79英文名称：Nitric acid：64872-77-分子量： C9H8Cl3N3O3S

氯,3-二甲咪唑分子式：32.59英文名称：Chlorinated ,3- two：7997-88-7分子量： C5H9ClN2

戊醛2,4-二硝分子式：266.25英文名称：4-dinitrophenylhydrazine aldehyde 2,4- two：2057-84-3分子量： CH4N4O4

培养步骤：
大鼠气管和支气管上皮细胞培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。