大鼠表皮角质形成细胞说明书

注意事项：
. 接收到大鼠表皮角质形成细胞说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

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大鼠表皮角质形成细胞【RatSkin:NormalEpidermalKeratinocytes】
    大鼠表皮角质形成细胞说明书 产品描述：大鼠表皮角化细胞主要分布于表皮基底层，在上皮程序性死亡后，细胞产生角化并移向表皮。体外培养的表皮角化细胞容易导致终末分化，不能充分增殖。表皮覆盖皮肤和粘膜表面，作为机体抵抗外界刺激的*道防御性屏障，具有其他器官不可替代的重要生理功能。角质形成细胞可产生粘附分子和细胞因子，与天然免疫和体内稳态相关。公司提供的大鼠表皮角质形成细胞，采用法制备而来。细胞的培养采用公司产品大鼠表皮角质形成细胞培养试剂盒(RatSkinPrimaCell™:NormalEpidermalKeratinocytesCatNo.3-7547)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，大鼠表皮角质形成细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、公司售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。​

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

人脐静脉平滑肌细胞大鼠冠状动脉平滑肌细胞*培养基

凝结芽孢杆菌 Bacillus coagulans铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa

HBE(人支气管上皮样细胞)lovo, 人结肠细胞

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus

苜蓿中华根瘤菌刺芹侧耳 Pleurotus eryngii

RN-h, 大鼠海马趾神经元小鼠成纤维细胞

深红酵母 Rhodotorula rubra人前脂肪细胞*培养基

苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens

人腺细胞厚垣孢普可尼亚菌 Pochonia chlamydosporia

大鼠表皮角质形成细胞说明书3-BOC--4-吡甲醛分子式：222.24英文名称：3-BOC- amino -4- pyridine formaldehyde：6026-95-0分子量： CH4N2O3

4,6-二羟-5-溴嘧分子式：90.98英文名称：4,6- two hydroxy -5-：5726-38-2分子量： C4H3BrN2O2

2,6-二异丙萘分子式：22.34英文名称：2,6- two ISO：2457-8-分子量： C6H20

6-氟-3-(4-)-,2-并异噁唑分子式：220.24英文名称：6氟- 3 -（4 -）-,2-并异噁唑：8463-77-9分子量： C2H3FN2O

4'-正戊-4-联(5-CB)分子式：249.35英文名称：4'- pentyl cyanobiphenyl (-4- 5-CB)：4087-08-分子量： C8H9N

4-苄-7-硝并氧杂恶二唑(BBD)英文名称：4- benzyl amino group -7- nitrobenzene and BBD ()分子式：270.24分子量： C3H0N4O3：8378-20-6

,2,4,5-四甲英文名称：,2,4,5- four toluene分子式：34.22分子量： C0H4：95-93-2

大豆苷英文名称：Soybean glycosides分子式：46.378分子量：C2H20O9：552-66-9

钙黄绿素英文名称：Calcein分子式：622.55分子量： C30H26N2O3：46-5-0

4-氯-2-硝甲酸分子式：20.56英文名称：4- chloride -2-：6280-88-2分子量： C7H4ClNO4

培养步骤：
大鼠表皮角质形成细胞说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。