人小脑颗粒细胞试剂盒培养

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人小脑颗粒细胞试剂盒【Human Brain PrimacellTM：Normal Cerebellar Granule Cells】
     人小脑颗粒细胞试剂盒培养颗粒细胞层在小脑形成的早期分离出来，并只产生颗粒细胞。小脑颗粒细胞是脑中数量多的神经元。 虽然人小脑机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的人小脑分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的人小脑片能使得人小脑中人小脑颗粒细胞的一些功能特性发生改变，从而将人小脑颗粒细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的人小脑颗粒细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的人小脑颗粒细胞中成纤维细胞的含量。 人小脑颗粒细胞培养试剂盒适合于培养人的成人小脑细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM人小脑颗粒细胞组织解离液（3×ml） （2）人小脑颗粒细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM人小脑颗粒细胞成纤维抑制剂（ml（500x）） （4）人小脑洗液 (5 x 00 ml) （5）人小脑颗粒细胞生长因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）人小脑颗粒细胞基础培养基 (5 x 00ml) （7）人成人小脑预备液 ( x 00 ml) （8）人小脑颗粒细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
人小脑颗粒细胞试剂盒培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

新型隐球酵母 Cryptococcus neoformans香菇 Lentinula edodes

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纤维苏云金芽胞杆菌猝倒亚种 Bacillus thuringiensis subsp. sotto

泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠支气管上皮细胞*培养基

HCCC-980(人肝内胆管细胞)香菇 Lentinula edodes

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3T3-L, 小鼠前脂肪细胞

黑曲霉 Aspergillus niger特异青霉(点青霉) Penicillium notatum

大鼠淋巴管内皮细胞*培养基苜蓿中华根瘤菌

酸球菌脂亚种 Lactococcus lactis subsp. cremorisRDFs, 大鼠真皮成纤维细胞

小鼠膀胱成纤维细胞*培养基屎肠球菌 Enterococcus faecium

膨端青霉 Penicillium inflatum苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

人小脑颗粒细胞试剂盒培养2-溴-5-氯三氟甲分子式：259.45英文名称：2- -5- three f：344-65-0分子量： C7H3BrClF3

2--4-羟吡分子式：0.英文名称：2- amino -4- hydroxy pyridine：3363-05-9分子量： C5H6N2O

六氟磷酸钾分子式：84.07英文名称：Six potassium fluoride：7084-3-8分子量： KF6P

4,4’-二甲联分子式：82.27英文名称：4,4 '- two methyl group：63-33-2分子量： C4H4

5,6-二甲氧-2-甲并噻唑分子式：209.26英文名称：5,6- two -2- methoxy methyl benzothiazole：62306-04-分子量： C0HNO2S

牡荆素葡萄糖苷英文名称：Vitexin glucoside分子式：594.52分子量：C27H30O5：7635-82-5

锌试剂英文名称：Zinc reagent分子式：440.43分子量： C20H6N4O6S：35-52-4

拟人参皂苷RT5英文名称：Human RT5分子式：654.88228分子量：C36H62O0：98474-78-3

,3,5-三[(3-吡)-3-]分子式：英文名称：,3,5- three [(3-) -3- phenyl] benzene：92205-03-0分子量：

对氯三氟甲分子式：80.6英文名称：To three f：98-56-6分子量： C7H4ClF3

注意事项：
. 接收到人小脑颗粒细胞试剂盒培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。