小鼠肌骼肌卫星细胞培养试剂盒说明书

小鼠肌骼肌卫星细胞培养试剂盒【MouseSkeletalPrimacellTM：Normal Skeletal Satellite Cells】
  小鼠肌骼肌卫星细胞培养试剂盒说明书肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维（肌细胞）外的一种扁平、有突起的细胞。附着于肌纤维（肌细胞）表面；当肌纤维（肌细胞）受损后，肌卫星细胞可增殖分化，参与肌纤维（肌细胞）的修复，因此具有干细胞性质。 虽然骨骼肌组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的骨骼肌组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的骨骼肌组织片能使得骨骼肌组织中成骨骼肌卫星细胞的一些功能特性发生改变，从而将成骨骼肌卫星细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成骨骼肌卫星细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个卫星细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的卫星细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的成骨骼肌原代卫星细胞中成纤维卫星细胞的含量。 小鼠肌骼肌卫星细胞卫星细胞培养试剂盒适合于培养人的成骨骼肌组织卫星细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肌骼肌卫星细胞组织解离液（3×ml） （2）小鼠肌骼肌卫星细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肌骼肌卫星细胞成纤维抑制剂（ml（500x）） （4）小鼠肌骼肌卫星细胞组织洗液（5x00 ml） （5）小鼠肌骼肌卫星细胞生长因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠肌骼肌卫星细胞基础培养基（5 x00ml） （7）小鼠肌骼肌卫星细胞组织预备液（ x00 ml） （8）小鼠肌骼肌卫星细胞培养试剂盒使用说明书

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注意事项：
. 接收到小鼠肌骼肌卫星细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：
小鼠肌骼肌卫星细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

产气肠杆菌 Enterobacter aerogenes根瘤菌 Rhizobium sp.

新生儿表皮角化细胞*培养基EA.hy926(人脐静脉细胞融合细胞)

产朊假丝酵母 Candida utilis植物杆菌 Lactobacillus plantarum

GH3(大鼠垂体瘤细胞)大鼠肺大动脉内皮细胞*培养基

酒假丝酵母 Candida kefyr球拟圆酵母 Torulopsis globosa

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

MLTC-(小鼠睾间质细胞瘤细胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformisNG08-5(小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞)

柱形孢链霉菌 Streptomyces cylindrosporus杆菌属 Lactobacillus sp.

人大细胞肺细胞苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

小鼠肌骼肌卫星细胞培养试剂盒说明书解毒喹英文名称：Detoxification分子式：335.83分子量： C8H22ClNO3：99607-70-2

5,5-二硫-,-双四氮唑分子式：354.4英文名称：5,5- two -,- double sulfur phenyl tetrazole：7574分子量： C4H0N8S2

2-氯-6-甲-4-吡甲醛分子式：55.58英文名称：2- -6- methyl -4-：47963-6-6分子量： C7H6ClNO

-苄分子式：75.27英文名称：- benzyl piperidine：2905-56-8分子量： C2H7N

苄分子式：22.7英文名称：Benzyl hydrazine：555-96-4分子量： C7H0N2

4-溴噻唑分子式：64.02英文名称：4- thiazole bromide：34259-99-9分子量： C3H2BrNS

安格洛苷C英文名称：Angelo C分子式：784.755分子量：C36H48O9：5909-22-3

4-羟-3-硝吡分子式：40.英文名称：4- hydroxy -3- nitro pyridine：5435-54-分子量： C5H4N2O3

,3,5-三乙分子式：62.27英文名称：,3,5- three ethyl benzene：02-25-0分子量： C2H8

2-乙酰胺-5-巯-,3,4-噻二唑分子式：75.23英文名称：2- acetyl -5- -,3,4- two：32873-56-6分子量： C4H5N3OS2