小鼠关节软骨细胞培养试剂盒培养

注意事项：
. 接收到小鼠关节软骨细胞培养试剂盒培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

公司向您小鼠关节软骨细胞培养试剂盒培养的详细说明：了解更多原代细胞培养点击进

小鼠关节软骨细胞培养试剂盒【Mouse Bone PrimacellTM：Normal Articular Chondrocytes】
     小鼠关节软骨细胞培养试剂盒培养小鼠软骨细胞分离自正常小鼠软骨组织，软骨细胞主要功能：（）软骨是人身体中唯不会发生癌变的组织。（2）骨骼在发育初期大部分是由软骨构成的。（3）软骨一般起到承重负荷，减少关节间骨骼摩擦等作用。生物科技提供的小鼠关节软骨细胞，均来自新鲜组织。细胞的培养采用公司专产品小鼠关节软骨细胞培养试剂盒(Mouse BonePrimaCell: Normal Articular ChondrocytesCat No.3-4022)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，小鼠关节软骨细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然关节组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的关节组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的关节组织片能使得关节组织中成关节细胞的一些功能特性发生改变，从而将成关节细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成关节细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的成关节原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠关节软骨细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的成关节组织细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM小鼠关节软骨细胞细胞组织解离液（3×ml） （2）小鼠关节软骨细胞细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠关节软骨细胞细胞成纤维抑制剂（ml（500x）） （4）小鼠关节软骨细胞组织洗液（5x00 ml） （5）小鼠关节软骨细胞细胞生长因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠关节软骨细胞细胞基础培养基（5 x00ml） （7）小鼠关节软骨细胞组织预备液（ x00 ml） （8）小鼠关节软骨细胞细胞培养试剂盒使用说明书​

人回盲肠细胞出芽短梗霉=出芽茁霉 Aureobasidium pullulans

苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensisHEC--B(人子宫内膜腺细胞)

淡青链霉菌 Streptomyces glaucescens酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠膀胱上皮细胞*培养基

SK-Hep-(人肝细胞)酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis

杆菌属 Lactobacillus sp.哈茨木霉

根瘤菌小鼠骨髓瘤细胞

UM-UC-3(人膀胱移行细胞)MG-63, 人骨肉瘤细胞

热带假丝酵母 Candida tropicalis嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus

接骨木镰孢豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

小鼠关节软骨细胞培养试剂盒培养新苷英文名称：Andrographis glycoside分子式：分子量：：

2,5-二氯-3-硝甲英文名称：2,5- two -3-分子式：236.0分子量： C7H3Cl2NO4：88-86-8

5-乙硫四氮唑分子式：30.7英文名称：5- ethylthio tetrazoline：89797-68-2分子量： C3H6N4S

溴酚红钠盐英文名称：Bromopyrogallol Red sodium salt分子式：534.5分子量： C9HBr2NaO5S：0285-50-2

6-溴-2-甲-,3-并噻唑分子式：228.英文名称：6- -2- -,3- benzothiazole methyl bromide：5304-2-2分子量： C8H6BrNS

2,5,6-三溴-3-甲吡分子式：329.8英文名称：2,5,6- three -3- methyl pyridine：39356-82-0分子量： C6H4Br3N

2-溴-5-(三氟甲氧)硝分子式：286英文名称：2- -5- (three f) nitrobenzene：95668-2-6分子量： C7H3BrF3NO3

癸二酸二酰分子式：230.3英文名称：Two sebacic acid hydrazide：25-83-7分子量： C0H22N4O2

2,2',3,3',4,5,6-七氯联分子式：395.32英文名称：2,2', 3,3', 4,5,6- seven：6894-6-分子量： C2H3Cl7

刚果红英文名称：Congo red分子式：696.66分子量： C32H22N6Na2O6S2：573-58-0

培养步骤：
小鼠关节软骨细胞培养试剂盒培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。