小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒说明书

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小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Lung PrimacellTM：NormalArtery Smooth Muscle Cells】
     小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒说明书小鼠肺大动脉平滑肌细胞分离自正常小鼠肺动脉组织，细胞呈梭形或多角形。该细胞所表达的钙通道表面表达的ICAM-和VCAM-，参与血管壁炎症反应。该细胞也是多数重要动脉疾病的靶细胞。 虽然肺大动脉组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肺大动脉组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肺大动脉组织片能使得肺大动脉组织中成肺大动脉细胞的一些功能特性发生改变，从而将成肺大动脉细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成肺大动脉细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的成肺大动脉原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养肺大动脉组织细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肺大动脉平滑肌细胞组织解离液（3×ml） （2）小鼠肺大动脉平滑肌细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肺大动脉平滑肌细胞成纤维抑制剂（ml（500x）） （4）小鼠肺大动脉平滑肌组织洗液（5x00 ml） （5）小鼠肺大动脉平滑肌细胞生长因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠肺大动脉平滑肌细胞基础培养基（5 x00ml） （7）小鼠肺大动脉平滑肌组织预备液（ x00 ml） （8）小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

赭绿青霉 Penicillium ochrochloronUM-UC-3, 人膀胱移行细胞

根瘤菌 Rhizobium sp.红曲霉 Monascus anka

PATU8988(人胰腺细胞)人睾支持细胞*培养基

双孢蘑菇 Agaricus bisporus鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus

胰凝蛋白酶(含0mL酶解缓冲液)苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis

小鼠肠粘膜上皮细胞*培养基SW 780(人膀胱移行细胞)

植物杆菌 Lactobacillus plantarum沟肠杆菌 Enterobacter cloacae

费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii异旋孢腔菌 Cochliobolus heterostrophus

mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞结肠

少根根霉 Rhizopus arrhizus人脑血管平滑肌细胞

小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒说明书3-氯-4-硝三氟甲分子式：225.55英文名称：3- -4- nitro three：402--9分子量： C7H3ClF3NO2

6-溴-2-乙酰吡分子式：200.03英文名称：6- -2- acetyl pyridine：49669-3-8分子量： C7H6BrNO

2-溴-5-氟甲分子式：89.02英文名称：2- -5- fluoride：452-63-分子量： C7H6BrF

2--5-巯-,3,4-噻二唑分子式：33.2英文名称：2- amino -5- -,3,4- two：2349-67-9分子量： C2H3N3S2

4,4''-二对三联分子式：482.英文名称：4,4''- two iodine to three：9053-4-6分子量： C8H2I2

3-(2,5-二甲氧)-H-吡唑分子式：英文名称：3- (2,5- two) -H-：822-45-2分子量： CH2N2O2

栀子甙英文名称：Gardenia分子式：388.37分子量：C7H24O0：2452-63-8

7-羟喹啉分子式：45.6英文名称：7- hydroxy group：580-20-分子量： C9H7NO

2-巯-6-甲并恶唑分子式：65.2英文名称：2- mercapto -6- methyl benzoxazole：22876-22-8分子量： C8H7NOS

,3,5-三(三氟甲)分子式：282.英文名称：,3,5- three (three f) benzene：729-8-7分子量： C9H3F9

注意事项：
. 接收到小鼠肺大动脉平滑肌细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。