小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒培养

小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒【Mouse Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts】
  小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒培养小鼠支气管成纤维细胞分离自正常小鼠支气管组织，呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。成纤维细胞是结缔组织中常见的一种细胞。可在支气管创伤后修复组织。 虽然支气管组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的支气管组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的支气管组织片能使得支气管组织中成支气管细胞的一些功能特性发生改变，从而将成支气管细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成支气管细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的成支气管原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒适合于培养人的成支气管组织细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM小鼠支气管成纤维细胞组织解离液（3×ml） （2）小鼠支气管成纤维细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠支气管成纤维细胞成纤维抑制剂（ml（500x）） （4）小鼠支气管成纤维细胞组织洗液（5x00 ml） （5）小鼠支气管成纤维细胞生长因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠支气管成纤维细胞基础培养基（5x00 ml） （7）小鼠支气管成纤维细胞组织预备液（ x00 ml） （8）小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒使用说明书

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注意事项：
. 接收到小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：
小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠肠静脉内皮细胞*培养基

大豆慢生根瘤菌植物杆菌 Lactobacillus plantarum

人结肠细胞根瘤菌 Rhizobium sp.

果香地霉 Colletotrichum musae酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis

球孢链霉菌 Streptomyces globisporus双孢蘑菇

大鼠角膜内皮细胞*培养基小鼠结肠平滑肌细胞*培养基

消化杆菌 Lactobacillus alimentarius人前列腺平滑肌细胞*培养基

香菇 Lentinula edodes酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

293A，人胚肾上皮细胞系（腺病毒包装级别）豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

天蓝色链霉菌 Streptomyces coelicolorVero(非洲绿猴肾细胞)

小鼠支气管成纤维细胞培养试剂盒培养4--2-硝甲分子式：52.5英文名称：4- amino -2- nitro toluene：9-32-4分子量： C7H8N2O2

3,5-二吡唑分子式：220.28英文名称：3,5-二吡唑：45-0-3分子量： C5H2N2

2,3,5-三氟吡分子式：33.07英文名称：2,3,5- three：76469-4-5分子量： C5H2F3N

4--6-羟-2-甲嘧二水合物分子式：6.6英文名称：4- amino -6- hydroxyl group -2- two hydrate：388582-4-0分子量： C5HN3O3

2-正戊呋喃分子式：38.2英文名称：2- pentyl furan：3777-69-3分子量： C9H4O

4-二甲吡(DMAP)分子式：22.7英文名称：4- two (DMAP)：22-58-3分子量： C7H0N2

4-硝邻二甲分子式：5.646英文名称：4- nitro ortho xylene：99-5-4分子量： C8H9NO2

丹磺酰英文名称：Dansyl chloride分子式：分子量：：605-65-2

四氢异喹啉分子式：33.9英文名称：Four hydrogen ISO：9-2-4分子量： C9HN

NBD-CO-Hz分子式：266.22英文名称：NBD公司赫兹：22263-97-4分子量： C9H0N6O4