小鼠前列腺上皮细胞培养试剂盒【Mouse Bone PrimacellTM:Osteblasts】
小鼠前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书前列腺(英文:prostate) 是雄性*的性腺器官。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠,所以有前列腺肿大时,可做直肠指诊,触知前列腺的背面。其中,小鼠前列腺上皮细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然前列腺上皮组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的前列腺上皮组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的前列腺上皮组织能使得前列腺上皮细胞的一些功能特性发生改变,从而将前列腺上皮细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养小鼠前列腺上皮细胞。本体系提供了佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以大程度地降低所培养的前列腺上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠前列腺上皮细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的前列腺上皮细胞。本试剂盒包含: ()OptiTDSTM小鼠前列腺上皮细胞组织解离液(3×ml) (2)小鼠前列腺上皮细胞组织处理缓冲液(00ml) (3)FibrOutTM小鼠前列腺上皮细胞成纤维抑制剂 ml(500x) (4)小鼠前列腺上皮组织洗液(5 x 00 ml) (5)小鼠前列腺上皮细胞生长因子(ml500x)及血清(5x0ml) (6)小鼠前列腺上皮细胞基础培养基(5 x 00ml) (7)小鼠前列腺上皮组织预备液 ( x 00 ml) (8)小鼠前列腺上皮细胞培养试剂盒使用说明书
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注意事项:
. 接收到小鼠前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
培养步骤:
小鼠前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按:2到:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
考马斯亮蓝R-250酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
新月弯孢霉 Curvularia lunata根瘤菌
人参刺盘孢 Colletotrichum panacicolaSNU-5(人胃细胞)
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞大鼠脑动脉血管平滑肌细胞*培养基
野生链球菌 Streptococcus ferus左旋酸芽孢杆菌 Bacillus laevolacticus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)MCF-7(人腺细胞)
瑞士杆菌 Lactobacillus helveticus嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
紫色直丝链霉菌 Streptomyces violaceorectus糙皮侧耳 Pleurotus ostreatus
大鼠视网膜神经节细胞*培养基小鼠肺动脉成纤维细胞*培养基
小鼠前列腺上皮细胞培养试剂盒说明书2,6-二羟萘分子式:60.7英文名称:2,6- two hydroxy naphthalene:58-43-分子量: C0H8O2
,4-二(2-甲乙)分子式:30.44英文名称:,4- two (2- methyl styrene group) benzene:3280-6-0分子量: C24H22
2--3-三氟甲吡分子式:62.英文名称:2- -3- three:8360-70-0分子量: C6H5F3N2
,7-二羟萘分子式:60.7英文名称:,7- two hydroxy naphthalene:575-38-2分子量: C0H8O2
5-(2-氯)H-四唑分子式:80.59英文名称:5 -(2 -氯)H四唑:50907-46-5分子量: C7H5ClN4
次百部碱英文名称:Sub base分子式:35.44分子量:C9H29NO5:
4-联分子式:280.英文名称:4- iodine:59-3-7分子量: C2H9I
二甲粉橙英文名称:Two a powder orange分子式:分子量::
2,5-双十二烷-,4-二--丙炔分子式:490.85英文名称:2,5- -,4- two -- didodecyl propargyl benzene:29628-0-0分子量: C36H58
4,8-二氯-2-三氯甲喹啉分子式:35.4英文名称:4,8- two -2- three:93600-66-9分子量: C0H4Cl5N
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