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小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书 | Mouse Bladder PrimaCell: Normal Bladder Smooth Muscle Cells | 来电可享受优惠 |
小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Bladder PrimaCell: Normal Bladder Smooth Muscle Cells】
小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书膀胱是一个储尿器官。在哺乳类,它是由平滑肌组成的一个囊形结构,位于骨盆内,其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌,可以控制尿液的排出其中,小鼠膀胱平滑肌细胞分离自正常小鼠膀胱平滑肌组织。膀胱是由平滑肌细胞组成的中空器官。人膀胱平滑肌细胞传0代以上仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然膀胱平滑肌组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的膀胱平滑肌组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的平滑肌组织片能使得膀胱平滑肌组织中细胞的一些功能特性发生改变,从而将膀胱平滑肌细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养小鼠膀胱平滑肌细胞。本体系提供了佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以大程度地降低所培养的膀胱平滑肌原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的膀胱平滑肌细胞。本试剂盒包含: ()OptiTDSTM小鼠膀胱平滑肌细胞组织解离液(3×ml) (2)小鼠膀胱平滑肌细胞组织处理缓冲液 (00ml) (3)FibrOutTM小鼠膀胱平滑肌细胞成纤维抑制剂 (ml(500x)) (4)小鼠膀胱平滑肌细胞组织洗液(5 x 00 ml) (5)小鼠膀胱平滑肌细胞生长因子(ml500x)及血清(5x0ml) (6)小鼠膀胱平滑肌细胞基础培养基(5 x 00ml) (7)小鼠膀胱平滑肌细胞组织预备液 ( x 00 ml) (8)小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤:
小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按:2到:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
小鼠肾小球内皮细胞*培养基花脸蘑 Lepista sordida
热带假丝酵母 Candida tropicalisSV-HUC-(人膀胱上皮永生化细胞)
毛木耳 Auricularia polytricha植物杆菌 Lactobacillus plantarum
人肾管状上皮细胞*培养基人胃粘膜上皮细胞*培养基
COLO 320DM(人结直肠腺细胞)kasumi-, 人白血病细胞株
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
金直丝链霉菌 Streptomyces aureorectus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
人胚肾细胞C6(大鼠胶质瘤细胞)
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞爪哇根霉 Rhizopus javanicus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae假单胞菌 Pseudomonas sp.
小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书庚醛英文名称:Enanthaldehyde分子式:4.8分子量: C7H4O:-7-7
4-反-乙环己溴分子式:267.208英文名称:4- anti - ethyl cyclohexyl bromide:9538-82-8分子量: C4H9Br
8-溴-4-氯-2-甲喹啉分子式:256.53英文名称:8- -4- chloride -2-:20-07-6分子量: C0H7BrClN
2-甲氧-3-硝-4-吡甲醛分子式:82.3英文名称:2-, -3-, -4-, P, P:22349-76-4分子量: C7H6N2O4
三氟甲分子式:46.英文名称:Three fluorine toluene:3605分子量: C7H5F3
3-羟-2,4,6-*(HTBA)英文名称:3- hydroxy -2,4,6- three iodo benzoic acid (HTBA)分子式:55.8分子量: C7H3I3O3:53279-72-4
亮绿SF淡黄英文名称:Light green SF分子式:792.85分子量: C37H34N2O9S3Na2:54-20-8
固蓝B英文名称:Solid blue B分子式:475.47分子量: C4H2CI2N4O2#:4263-94-6
N-(2-乙酰胺)-2-亚二乙(ADA)英文名称:N- (2-) -2- two acetic acid (ADA)分子式:90.5分子量: C6H0N2O5:26239-55-4
N-(乙酰)-2-乙烷磺(ACES)英文名称:N- (acetaminophen) -2- amino acid (ACES)分子式:82.9分子量: C4H0N2O4S:7365-82-4
注意事项:
. 接收到小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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