小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒说明书

注意事项：
. 接收到小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

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小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒【Mouse FatPrimaCell: Normal Visceral Fat Cells】
     小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒说明书内脏是指在体腔内，借管道直接或间接与外界相通的器官的总称。主要包括人体胸腹部内脏器官的分布：肝脏、胆囊、胃、肾、小肠、脾、直肠、十二指肠、胰、输尿管、卵巢、膀胱、子宫。其中，小鼠内脏脂肪细胞主要存在于结缔组织中，能够合成和贮存脂肪。成熟的脂肪细胞呈圆形，胞浆内富含脂滴。脂肪细胞在脂类代谢，能量平衡以及抵抗炎症等方面起重要作用，与肥胖，高血脂、糖尿病、乳癌等多种生理疾病密切相关。 利用本公司试剂盒中提供的内脏组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的内脏组织能使得内脏组织中脂肪细胞的一些功能特性发生改变，从而将脂肪细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养小鼠内脏脂肪细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的脂肪原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的内脏脂肪细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM小鼠内脏脂肪细胞组织解离液（3×ml） （2）小鼠内脏脂肪细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠内脏脂肪细胞成纤维抑制剂（ml（500X）） （4）小鼠内脏脂肪组织洗液（5 x 00 ml） （5）小鼠内脏脂肪细胞生长因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）小鼠内脏脂肪细胞基础培养基（5 x 00ml） （7）小鼠内脏脂肪组织预备液（ x 00 ml） （8）小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒使用说明书​

苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

AsPC-(人胰腺细胞)5×06cells/瓶×2

芽孢杆菌属 Bacillus sp.

Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)规格：

粘红酵母 Rhodotorula glutinis

黑木耳 Auricularia auricula

中国仓鼠卵巢细胞英文名称：

小鼠肠微血管细胞*培养基00mL

平滑正青霉 Eupenicillium levitum

费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii

小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒说明书依普黄酮英文名称：Ipriflavone分子式：280.32分子量： C8H6O3：3522-22-7

4-四氢吡喃分子式：38.54英文名称：4- - four hydrogen pyran：836-77-7分子量： C2H6Cl3NO3

3,5-二甲并(B)硫代分子式：62.25英文名称：3,5- two methyl benzene (B)：964-45-0分子量： C0H0S

2,4-二磺酰二氯均*分子式：37.2英文名称：2,4- two chloride two chloride three：68985-08-0分子量： C9H0Cl2O4S2

N-氨丙啡啉分子式：44.2英文名称：N- aminopropyl morpholine：23-00-2分子量： C7H6N2O

四亚甲亚砜分子式：04.7英文名称：Methylene four：600-44-8分子量： C4H8OS

4,6-二甲-2-巯嘧分子式：40.2英文名称：4,6- two methyl -2-：22325-27-5分子量： C6H8N2S

-[2-(三氟甲)]咪唑分子式：22.8英文名称：-[2- (three f) phenyl]：2537-96-4分子量： C0H7F3N2

2,5-二氯吡分子式：47.99英文名称：2,5- two：60-09-分子量： C5H3Cl2N

乙酸分子式：50.8英文名称：Phenyl acetic acid：937-39-3分子量： C8H0N2O

培养步骤：
小鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。