大鼠成骨细胞培养试剂盒培养

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大鼠成骨细胞培养试剂盒【Rat Bone PrimacellTM：Normal Osteoblastic Cells】
     大鼠成骨细胞培养试剂盒培养骨代谢过程中，成骨细胞和破骨细胞相互协调，使骨质的形成与吸收处于一种动态平衡，维持骨骼的不断更新。其中，成骨细胞是骨形成细胞，对骨组织的生长发育、骨代谢平衡、骨量平衡和骨损伤修复起关键作用。体外培养成骨细胞，作为常用的体外实验模型，成为研究骨生理、病理及修复的重要手段，也成为研究成骨细胞生长代谢及骨组织工程的基础。 虽然骨组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的骨组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的骨组织片能使得骨组织中成骨细胞的一些功能特性发生改变，从而将成骨细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年大鼠的成骨细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的成骨原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠成骨细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的成骨组织细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM大鼠成骨细胞组织解离液（3×ml） （2）大鼠成骨细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠成骨细胞成纤维抑制剂（ml（500x）） （4）大鼠成骨组织洗液（5x00 ml） （5）大鼠成骨细胞生长因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠成骨细胞基础培养基（5 x00ml） （7）大鼠成骨组织预备液（ x00 ml） （8）大鼠成骨细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
大鼠成骨细胞培养试剂盒培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus

小鼠肠巨噬细胞*培养基00mL

人内脏脂肪细胞*培养基00mL

茄腐镰刀菌 Fusarium solani

Hepa -6, 小鼠肝细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桔橙小单孢菌 Micromonospora aurantiaca

大鼠神经元细胞*培养基00mL

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis

黑白轮枝孢

大鼠成骨细胞培养试剂盒培养3-(3-溴)吡分子式：234.092英文名称：3- (3-) pyridine：4422-32-6分子量： CH8BrN

2-羟-3-硝-5-(三氟甲)吡分子式：208.09英文名称：2- hydroxy -3- nitro -5- (three f) pyridine：33252-64-分子量： C6H3F3N2O3

2-嘧分子式：95.英文名称：2- amino group：09-2-6分子量： C4H5N3

氨丙咪唑分子式：英文名称：Ammonium group：分子量：

碱性品绿英文名称：Basic green分子式：364.9分子量： C23H25ClN2：569-64-2

二甲萘分子式：56.22英文名称：Two methyl naphthalene：28804-88-8分子量： C2H2

茶海明英文名称：Dramamine分子式：499.95分子量： C7H2NO.C7H7ClN4O：523-87-5

人参皂甙Rc英文名称：Ginsenoside Rc分子式：079.2685分子量：C53H90O22：02-4-0

3-(4-溴)-5-甲-H-吡唑分子式：英文名称：3- (4-) -5- methyl -H-：45353-53-3分子量： C0H9BrN2

三乙氢硼钾分子式：38.英文名称：Three ethyl potassium：22560-2-0分子量： C6H6BK

注意事项：
. 接收到大鼠成骨细胞培养试剂盒培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。