大鼠滑膜细胞培养试剂盒说明书

大鼠滑膜细胞培养试剂盒【Rat Bone Joint: PrimacellTM：Normal Synovial Cell】
  大鼠滑膜细胞培养试剂盒说明书大鼠滑膜细胞分离自正常大鼠滑膜组织，滑膜细胞主要功能：（）滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关。（2）滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏。（3）是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。 虽然滑膜组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的滑膜组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的滑膜组织片能使得滑膜组织中成滑膜细胞的一些功能特性发生改变，从而将成滑膜细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成滑膜细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的成滑膜原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠滑膜细胞细胞培养试剂盒适合于培养人的成滑膜组织细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM大鼠滑膜细胞细胞组织解离液（3×ml） （2）大鼠滑膜细胞细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠滑膜细胞细胞成纤维抑制剂（ml（500x）） （4）大鼠滑膜细胞组织洗液（5x00 ml） （5）大鼠滑膜细胞细胞生长因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠滑膜细胞细胞基础培养基（5 x00ml） （7）大鼠滑膜细胞组织预备液（ x00 ml） （8）大鼠滑膜细胞细胞培养试剂盒使用说明书

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注意事项：
. 接收到大鼠滑膜细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：
大鼠滑膜细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

木生条孢牛肝菌 Boletellus emodensis

弹性蛋白酶(含00mL酶解缓冲液)0mL

热带假丝酵母 Candida tropicalis

小鼠视网膜色素上皮细胞*培养基00mL

人肾系膜细胞*培养基00mL

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

醋酸钙不动杆菌 Acinetobacter calcoaceticus

TE-3(人食管细胞)5×06cells/瓶×2

V79(仓鼠肺细胞)5×06cells/瓶×2

热带假丝酵母 Candida tropicalis

大鼠滑膜细胞培养试剂盒说明书氟啉分子式：37.406英文名称：Fu Malan：2867-47-9分子量： C2H22FNO4

4,5-二氮芴-9-酮(DAFO)英文名称：4,5- two -9- (DAFO) n fluorene ketone分子式：82.8分子量： CH6N2O：50890-67-0

百秋里英文名称：Patchouli alcohol分子式：分子量：：

十三英文名称：Thirteen acid分子式：24.34分子量： C3H26O2：638-53-9

二苄分子式：208.26英文名称：Two benzyl hydrazine：588-68-分子量： C4H2N2

丙五氟分子式：208.3英文名称：Allyl - five：736-60-3分子量： C9H5F5

硝酸锰分子式：25.0英文名称：Manganese nitrate：20694-39-7分子量： Mn(NO3)2.4H2O

2-甲吡分子式：93.3英文名称：2- methyl pyridine：09-06-8分子量： C6H7N

2-硝-3-甲吡分子式：38.2英文名称：2- nitro -3- methyl pyridine：8368-73-5分子量： C6H6N2O2

-氟萘分子式：46.6英文名称：- f：32-38-0分子量： C0H7F