大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒说明书

公司向您大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒说明书的详细说明：了解更多原代细胞培养点击进

大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒【Rat Lung PrimacellTM：Normal Artery Fibroblasts】
     大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒说明书大鼠肺大动脉内皮细胞分离自正常大鼠肺组织，呈单层多角形铺路石状分布。该细胞在维持血管内外的动态平衡，合成和分泌细胞因子和介质，维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。 虽然肺动脉组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肺动脉组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肺动脉组织片能使得肺动脉组织中大鼠肺动脉成纤维细胞的一些功能特性发生改变，从而将大鼠肺动脉成纤维细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的大鼠肺动脉成纤维细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。 大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒适合于培养人的大鼠肺动脉成纤维细胞组织细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM大鼠肺动脉成纤维细胞组织解离液（3×ml） （2）大鼠肺动脉成纤维细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）大鼠肺动脉成纤维细胞组织洗液（ml（500x）） （4）大鼠肺动脉成纤维细胞生长因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （5）大鼠肺动脉成纤维细胞基础培养基（5 x00ml） （6）大鼠肺动脉成纤维细胞组织预备液（ x00 ml） （7）大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

小鼠真皮成纤维细胞*培养基00mL

热带假丝酵母 Candida tropicalis

毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes

人髂动脉内皮细胞*培养基00mL

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

植物杆菌 Lactobacillus plantarum

Calu-6(人肺退行性细胞)5×06cells/瓶×2

酒假丝酵母 Candida kefyr

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

MG-63(人骨肉瘤细胞)5×06cells/瓶×2

大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒说明书3-溴吡分子式：58英文名称：3- bromide：626-55-分子量： C5H4BrN

4-氯-3-硝三氟甲氧分子式：英文名称：4- -3- nitro group three：4324535分子量：

,5-二硝萘分子式：28.7英文名称：,5- two nitro naphthalene：605-7-0分子量： C0H6N2O4

邻硝对甲砜甲分子式：25.23英文名称：Ortho para nitro group for toluene：67-49-4分子量： C8H9NO4S

,2,3-三氯英文名称：,2,3- three分子式：8.45分子量： C6H3Cl3：87-6-6

喹啉酸分子式：67.2英文名称：Acid：89-00-9分子量： C7H5NO4

对三联分子式：230.3英文名称：To three：92-94-4分子量： C8H4

7-硝喹啉分子式：74.6英文名称：7- nitro group：63-5-4分子量： C9H6N2O2

3,5-二氯溴分子式：225.9英文名称：Two - 3,5- chloride：9752-55-7分子量： C6H3BrCl2；BrC6H3Cl2

碱性蓝G英文名称：Alkaline blue G分子式：分子量：：

注意事项：
. 接收到大鼠肺动脉成纤维细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。