大鼠肾足突细胞培养试剂盒说明书

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大鼠肾足突细胞培养试剂盒【Rat kidney PrimaCell: Normal Renal Podocytes】
  大鼠肾足突细胞培养试剂盒说明书肾是脊椎动物的一种器官，属于泌尿系统的一部分，负责过滤血液中的杂质、维持体液和电解质的平衡，后产生尿液经由后续管道排出体外；同时也具备内分泌的功能以调节血压。在人体中，正常成人具备两枚肾脏，位于腰部两侧后方。其中，大鼠肾足突细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然肾足突组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾足突组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肾足突组织片能使得肾足突组织中细胞的一些功能特性发生改变，从而将肾足突细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养大鼠肾足突细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的肾足突原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠肾足突细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的肾足突细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM大鼠肾足突细胞组织解离液(3×ml) （2）大鼠肾足突细胞组织处理缓冲液(00ml) （3）FibrOutTM大鼠肾足突细胞成纤维抑制剂 (ml（500x）) （4）大鼠肾足突细胞组织洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠肾足突细胞生长因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠肾足突细胞基础培养基(5 x 00ml) （7大鼠肾足突组织预备液 ( x 00 ml) （8）大鼠肾足突细胞培养试剂盒使用说明书

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注意事项：
. 接收到大鼠肾足突细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

培养步骤：
大鼠肾足突细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

AFP / alpha-fetoprotein 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD77 / PRV- / PRV 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

GCSH 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 µg

CQBP / HABP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IP    50 µg

SCGN / Secretagogin 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L 抗體, 兔單抗 WB   IF   IP  ICC/IF    50 µg

BCL2 / Bcl-2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µL

CD0 / Neprilysin / MME 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD2 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

ICOS Ligand / B7-H2 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

大鼠肾足突细胞培养试剂盒说明书硫酸铬钾分子式：499.4英文名称：Potassium chromium sulfate：7788-99-0分子量： CrKO8S2.2H2O

,3,5-三异丙分子式：204.35英文名称：,3,5- three ISO：77-74-8分子量： C5H24

2-溴---4-硝分子式：327.9英文名称：2- -- -4-：749-4-6分子量： C6H3BrINO2

六羰钼分子式：264英文名称：Six carbonyl molybdenum：3939-06-5分子量： C6MoO6

4-氯-7-硝-2,,3-并氧杂恶二唑(NBD-Cl)英文名称：4-, -7-, -2,,3-,, NBD-Cl, and oxygen, two分子式：99.55分子量： C6H2CLN3O3：099-89-0

(2B油）邻氯对甲分子式：4.6英文名称：(2B) ortho chlorine to amino toluene：95-74-9分子量： C7H8ClN； ClC6H3(CH3)NH2

-甲-5-乙氧羰吡唑分子式：英文名称：- methyl -5- ethyl：97079-26-8分子量： C7H0N2O2

二脲分子式：242.28英文名称：Two phenyl urea：40-22-7分子量： C3H4N4O； C6H5NHNHCONH

丙酸钾分子式：2.7英文名称：Potassium propionate：327-62-8分子量： C3H5KO2

人参皂苷Rb3英文名称：Ginsenoside Rb3分子式：079.2685分子量：C53H90O22：68406-26-8