大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒说明书

注意事项：
. 接收到大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

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大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒【Rat Ovary PrimaCell: Normal Ovary Granule Cells】
     大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒说明书卵巢是雌性动物的生殖器官。卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。其中，大鼠卵巢颗粒细胞主要功能为产生性激素，并且与相关的生长因子相互作用促进卵母细胞的发育。大鼠卵巢颗粒细胞传3-5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的卵巢组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的卵巢组织能使得卵巢组织颗粒细胞的一些功能特性发生改变，从而将颗粒细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养大鼠卵巢颗粒细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的卵巢额颗粒原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的卵巢颗粒细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM大鼠卵巢颗粒细胞组织解离液 (3×ml) （2）大鼠卵巢颗粒细胞组织处理缓冲液 (00ml) （3）FibrOutTM大鼠卵巢颗粒细胞成纤维抑制剂(ml（500x）) （4）大鼠卵巢颗粒组织洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠卵巢颗粒细胞生长因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠卵巢颗粒细胞基础培养基(5 x 00ml) （7）大鼠卵巢颗粒组织预备液 ( x 00 ml) （8）大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒使用说明书​

TIMP- / TIMP 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

4-3-3 eta / YWHAH 抗體, 鼠單抗 ELISA   WB   IP   50 µg

CD200 / OX-2 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µL

Carboxypeptidase B / CPB 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

Lipopolysaccharide binding 蛋白 / LBP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

Angiopoietin-2 / ANG 2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 µg

Neuropilin 2 / NRP2 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test

PDGFRa / CD40a 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

ADSL / Adenylosuccinate Lyase 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CHI3L / YKL40 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒说明书-正丁-4-[(4-乙氧)乙炔]分子式：278.39英文名称：- butyl -4-[(4-) - phenyl group：85583-83-分子量： C20H22O

2,5-二氯-3-(二氟甲)吡分子式：97.998英文名称：2,5- two -3- (two Fu Jiaji) pyridine：770-93-4分子量： C6H3Cl2F2N

,4-二(溴甲)-2-甲氧-5-(2-乙己氧)分子式：422.2英文名称：,4- two (Xiu Jiaji) -2-, -5- (2-), benzene：209625-37-6分子量： C7H26Br2O2

4-溴-5--H-,2,3-三唑分子式：224英文名称：4- -5- three：2505-4-6分子量： C8H6BrN3

邻溴分子式：282.9英文名称：O-iodine Bromophenyl：583-55-分子量： C6H4BrI

4-(6-氯-3-哒嗪)啉分子式：99.64英文名称：4- (6- -3-) Ma Lan：7259-32-4分子量： C8H0ClN3O

2,9-二-,0-菲咯啉分子式：332.4英文名称：2,9- two phenyl -,0-：25677-69-4分子量： C24H6N2

2-(N-脯氨)-5-硝吡分子式：223.23英文名称：2- (N- prolinol) -5- nitropyridine：88374-37-2分子量： C0H3N3O3

2-[双(三氟磺酰)亚]-5-氯吡分子式：392.67英文名称：2-[bis (three f) and]-5-：4500-5-2分子量： C7H3ClF6N2O4S2

柴胡皂苷C英文名称：Radix C分子式：943.2分子量：C48H78O8：20736-08-7

培养步骤：
大鼠卵巢颗粒细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。