大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书

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大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Epithelial Cells】
     大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书大鼠角膜是唯的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能。分三层细胞层，外层即是上皮细胞。其中，角膜上皮细胞能参与先天性免疫，能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统。角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶，防止UV-和4-羟基壬烯醛对细胞造成伤害。大鼠角膜上皮细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的角膜组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的角膜组织能使得角膜组织中上皮细胞的一些功能特性发生改变，从而将上皮细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养大鼠角膜上皮细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的角膜上皮细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM组大鼠角膜上皮细胞织解离液（3×ml） （2）大鼠角膜上皮细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠角膜上皮细胞成纤维抑制剂（ml（500X）） （4）大鼠角膜上皮组织洗液（5 x 00 ml） （5）大鼠角膜上皮细胞生长因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠角膜上皮细胞基础培养基（5 x 00ml） （7）大鼠角膜上皮组织预备液（ x 00 ml） （8）大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

PCNA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IF  IP   ICC/IF    50 µg

erpinF2 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

Coagulation Factor VIII / FVIII / F8 抗體 (Heavy Chain), 兔單抗 ELISA    50 µg

CRELD 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

STMN / Stathmin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Pancreasin / Marapsin / PRSS27 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD59 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM    25 Test

ITGA6 & ITGB Heterodimer 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

LDLR / LDL Receptor 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CD48 / SLAMF2 / BCM 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 µg

大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书哈巴苷英文名称：Harpagide分子式：364.35分子量：C5H24O0：835927

2,3,9,0,6,7,23,24-八氟酞菁铜(II)(升华纯)分子式：720.0英文名称：2,3,9,0,6,7,23,24 -八氟酞菁铜（II）（升华纯）：4865-60-9分子量： C32H8CuF8N8

3-(三氟甲)*氢氧铵英文名称：3- (three f) phenyl three methyl hydroxide分子式：22.22分子量： C0H4F3NO：68254-4-

2-羟甲-3,4-二甲氧吡分子式：69.8英文名称：2-, -3,4- two：72830-08-分子量： C8HNO3

2-氯-3-乙酰吡分子式：55.58英文名称：2- -3- acetyl pyridine：55676-2-6分子量： C7H6ClNO

硝酸铝九水合物分子式：375.3英文名称：Aluminum nitrate nine hydrate：7784-27-2分子量： Al(NO3)3•9H2

吉拉尔特试剂T英文名称：Giralt reagent T分子式：67.64分子量： C5H4ClN3O：23-46-6

PMBP(萃取剂Ⅱ)英文名称：PMBP (extraction agent II)分子式：分子量：：

聚对二氯甲分子式：277.9英文名称：Poly two chlorine toluene：28804-46-8分子量： C6H4Cl2

八氟萘分子式：248.075英文名称：Eight f：33-72-4分子量： C8F8

注意事项：
. 接收到大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。