大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒说明书

注意事项：
. 接收到大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒说明书，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

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大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒【Rat EyePrimaCell: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】
     大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒说明书视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。其中，视网膜色素上皮参与循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。大鼠视网膜色素上皮细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的视网膜组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的视网膜组织能使得视网膜组织中色素上皮细胞的一些功能特性发生改变，从而将色素上皮细胞分离开来。。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的视网膜色素上皮细胞。

本试剂盒包含： （）OptiTDSTM大鼠视网膜色素上皮细胞组织解离液（3×ml） （2）大鼠视网膜色素上皮细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠视网膜色素上皮细胞成纤维抑制剂（ml（500X）） （4）大鼠视网膜色素上皮组织洗液（5 x 00 ml） （5）大鼠视网膜色素上皮细胞生长因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠视网膜色素上皮细胞基础培养基（5 x 00ml） （7）大鼠视网膜色素上皮组织预备液（ x 00 ml） （8）大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒使用说明书​

B7-H5 / GI24 / VISTA 抗體, 兔多抗 ELISA    200 µg

CD85 / ILT2 / ILR / LILRB 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD300C 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

PDZD / PDZK 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

LFA-3 / CD58 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

CSNKG2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

JAM-A / FR 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Apolipoprotein H / APOH 抗體, 兔單抗 ELISA   IHC-P    50 µg

IL-2R 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

SerpinA8 / Angiotensinogen / AGT 抗體, 兔單抗 ELISA   WB   IF  IP   ICC/IF    50 µg

大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒说明书阿尼西坦英文名称：Arnie Si Staw分子式：29.24分子量： C2H3NO3：72432-0-

5--2-甲氧吡分子式：24.4英文名称：5- amino -2- a：6628-77-9分子量： C6H8N2O

(R,R)-(+)-2,2'-异亚丙双(4-叔丁-2-恶唑啉)分子式：294.44英文名称：(R, R) - (+) -2,2'- isopropylidenebis (4- tert butyl -2- oxazolinyl)：3833-97-分子量： C7H30N2O2

3,3'-二(9H-咔唑-9-)-,'-联吡分子式：484.6英文名称：Two 3,3'- (9H- -9- -,'- bipyridine carbazole)：342638-54-4分子量： C36H24N2

钴粉/钴片分子式：58.93英文名称：Cobalt powder / cobalt film：7440-48-4分子量： Co

色素(水溶)英文名称：Melanin (Shui Rong)分子式：分子量：：2229872

碱性品蓝英文名称：Basic blue分子式：分子量：：

(钯试剂)4-(8-羟-5-喹啉偶氮)萘磺英文名称：(palladium reagent) 4- (8- hydroxy -5-) naphthalene sulfonic acid分子式：379.39分子量： C9H3N3O4S：26644-96-2

醋环丙氯地孕酮英文名称：Acetic acid and chloride分子式：46.94分子量： C24H29ClO4：427-5-0

2--3,5-二溴-6-甲吡分子式：265.94英文名称：2- amino -3,5- dibromo -6- methyl pyridine：9872-0-5分子量： C6H6Br2N2

培养步骤：
大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。