大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒培养

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大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒【Rat FatPrimaCell: Normal Subcutaneous Fat Cells】
     大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒培养大鼠皮下脂肪细胞主要存在于结缔组织中，能够合成和贮存脂肪。成熟的脂肪细胞呈圆形，胞浆内富含脂滴。其中，脂肪细胞在脂类代谢，能量平衡以及抵抗炎症等方面起重要作用，与肥胖，高血脂、糖尿病、乳癌等多种生理疾病密切相关。大鼠皮下脂肪细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的皮下组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的皮下组织能使得皮下组织中脂肪细胞的一些功能特性发生改变，从而将脂肪细胞分离开来。

本试剂盒适用于分离培养大鼠皮下脂肪细胞。本体系提供了佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以大程度地降低所培养的脂肪原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的皮下脂肪细胞。本试剂盒包含： （）OptiTDSTM大鼠皮下脂肪细胞组织解离液（3×ml） （2）大鼠皮下脂肪细胞组织处理缓冲液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠皮下脂肪细胞成纤维抑制剂（ml（500X）） （4）大鼠皮下脂肪组织洗液（5 x 00 ml） （5）大鼠皮下脂肪细胞生长因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠皮下脂肪细胞基础培养基（5 x 00ml） （7）大鼠皮下脂肪组织预备液（ x 00 ml） （8）大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒使用说明书
培养步骤：
大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按：2到：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按：2到：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。​

SLAMF6 / Ly08 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

YKL-39 / CHI3L2 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

FABP4 / ALBP / A-FABP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 µg

CD59 抗體 (PerCP), 兔單抗 FCM    25 Test

ITGA6 & ITGB Heterodimer 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

EMR 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg

ASAM / CLMP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

IRAK4 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB    50 µg

TIMP- / TIMP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

HPRG / HRG 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒培养2--5-溴嘧分子式：74英文名称：2- amino -5-：7752-82-分子量： C4H4BrN3

二氯荧光黄英文名称：Two chlorine fluorescence yellow分子式：40.2分子量： C20H0Cl2O5：76-54-0

苦木提取物英文名称：Quassia extract分子式：分子量：：

-金刚烷乙英文名称：- diamond分子式：94.27分子量： C2H8O2：4942-47-6

黄叱精Y英文名称：Huang Chijing Y分子式：248.7分子量： C2H3ClN4：532-82-

2,6-二羟-3,4-二甲吡分子式：39.5英文名称：2,6- two hydroxy -3,4- two methyl pyridine：84540-47-6分子量： C7H9NO2

升麻素苷英文名称：Prim-o-glucosylcimifugin分子式：468.452分子量：C22H28O：8068-45-4

2-吡嗪羧酸铜(II)分子式：309.727英文名称：2吡嗪羧酸铜（II）：304656-23-3分子量： C0H6CuN4O4

苏丹英文名称：Sultan black B分子式：456.54分子量： C29H24N6：497-25-5

3,5-二叔丁溴分子式：269.22英文名称：3,5- tert butyl bromobenzene：22385-77-9分子量： C4H2Br

注意事项：
. 接收到大鼠皮下脂肪细胞培养试剂盒培养，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。