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人滑膜组织提取物说明书 | Bone: Normal Human Synovial Derivatives | 来电可享受优惠 |
人滑膜组织提取物【Bone: Normal Human Synovial Derivatives】
人滑膜组织提取物说明书滑膜组织主要功能:()产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关。(2)是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。公司科技提供来自新鲜或冷冻人滑膜组织中高质量的总RNA,PCR准备的*条cDNA链,蛋白质及其亚组分。这些临床定义的正常人体组织标本采集自各地方医院,采集工作根据IRB和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA*链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及0mg总RNA。68℃反应0min 后终止RT反应。利用x RT Buffer 运输cDNA, μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 潜在的应用: <>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
培养步骤:
人滑膜组织提取物说明书对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按:2到:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按:2到:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
兔抗R多克隆抗体 英文名:Anti-R rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗R4多克隆抗体 英文名:Anti-R4 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗SLC6A3多克隆抗体 英文名:Anti-SLC6A3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗LAMP3多克隆抗体 英文名:Anti-LAMP3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗LY75多克隆抗体 英文名:Anti-LY75 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗B多克隆抗体 英文名:Anti-B rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗EFA多克隆抗体 英文名:Anti-EFA rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗EIF4G2多克隆抗体 英文名:Anti-EIF4G2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ap3多克隆抗体 英文名:Anti-ap3 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗NUFA2多克隆抗体 英文名:Anti-NUFA2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗ISC多克隆抗体 英文名:Anti-ISC rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
兔抗TNFRSF2多克隆抗体 英文名:Anti-TNFRSF2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
人滑膜组织提取物说明书Lyticase 溶壁酶 g 瓶
Allocryptopine 别隐品碱 485-9-6 20mg
Myrislignan 肉豆蔻木脂素 7485-39-5 20mg
24孔培养板 00块/箱 块
5%BSA封闭液 00ml 瓶
结晶紫染色液(0.%) 500ml 瓶
SP Sepharose FF SP-琼脂糖凝胶 FF 00ml 瓶
α-Amylase a- 250g 瓶
Phillyrin 连翘苷 487-4-2 20mg
Solar Fluor 647(效果同Alexa Fluor 647)琥珀酰亚胺酯 mg 支
豚鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒 200ml/KIT 盒
注意事项:
. 接收到人滑膜组织提取物说明书,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞00X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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